猪脂肪间充质干原代细胞

猪脂肪间充质干原代细胞

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

猪脂肪间充质干细胞分离自脂肪组织；脂肪组织主要由大量群集的脂肪细胞构成，聚集成团的脂肪细胞由薄层疏松结缔组织分隔成小叶；贮存的脂肪，在需要时可迅速分解成甘油和脂肪酸，经血液输送到各组织以供利用。它们影响胰岛素敏感性、血压水平、内皮功能、纤溶活动及炎症反应，参与多种重要病理生理过程；脂肪组织已由过去单纯作为能量储存的器官而成为一个极其重要的内分泌系统。脂肪组织中也存在一些干细胞群，具有自我更新能力和多向分化潜能，被称为脂肪组织来源的间充质干细胞，简称脂肪间充质干细胞。与骨髓间充质干细胞相比，在来源、细胞群特点以及分化潜能等多方面极为相似。但是，脂肪间充质干细胞更易获得足够数量的细胞，且获取过程中对机体损伤更小，是更为理想的自体干细胞源。脂肪组织分离得到脂肪间充质干细胞以梭形为主要形态，BrdU可标记其细胞核。

方法简介：

公司实验室分离的猪脂肪间充质干细胞采用胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的猪脂肪间充质干细胞经CD90免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。

大鼠淋巴纤维细胞(RLF)(5×105)  人神经细胞HN  CM-H118人脑静脉血管平滑肌细胞鼬肺上皮细胞;MV-1-Lu  Lewis   小鼠肺癌细胞  人羊膜上皮细胞 Human 人原代输卵管平滑肌细胞 小鼠原代皮下微血管内皮细胞

糖原0酸化酶M(PYGM)重组蛋白 Recombinant Glycogen Phosphorylase, Muscle (PYGM)

IL18R1 Protein Human 重组人 IL18R1 / CD218a 蛋白 (His & Fc 标签)

LEP重组人 Leptin 蛋白 Protein

HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Common magpie/Hong Kong/2256/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

AOC1重组人 AOC1 / Diamine oxidase 蛋白 Protein

大鼠多药耐药蛋白1(ABCB1)试剂盒 ，英文名： ABCB1 ELISA Kit

Porcine glucose anspoer 2 (GL2) ELISA Kit 猪葡萄糖转运蛋白2(GL2)试剂盒

动物源性成分(18S)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

CLIAKitforLZM(RabbitLysozyme)ELISAKit兔

体液总胆汁酸酶循环比色法定量试剂盒20次

ELISAKitPF-4/CXCL4鸡血小板因子4

小鼠转化生长因子-β2(mouse TGF-β2)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

小鼠可溶性粒细胞靶受体(mouse sEM-1)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

小鼠端粒酶(mouse Telomerase)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

小鼠Toll样受体-2(mouse TLR-2)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

猪脂肪间充质干原代细胞小鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human soluble tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand (sAIL) ELISA Kit 人可溶性坏死因子相关凋亡诱导配体(sAIL)试剂盒

Human17-ketosteroids,17-KSELISAKit 人17-酮类固醇(17-KS)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitfor1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD3(Human1,25-dihydroxyvitaminD3)ELISAKit人1,25二羟基3

饮料糖精(saccharin)含量高效液相色谱法定量试剂盒20次

Mousekeratinocyteaocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISAKit小鼠角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)试剂盒规格：96T/48T

GFRA1重组狗 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白 Protein

NR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C 0.5mgNR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C) 谷受体2C(多肽)

CA3重组人 Carbonic Anhydrase III / CA3 蛋白 Protein

CCL27 Protein Human 重组人 CCL27 / CTACK 蛋白

GLIPR1 Protein Mouse 重组小鼠 GLIPR1 / RTVP1 蛋白