Edu染色服务

Edu染色服务：实验步骤

1.将处于对数生长期的各实验组细胞**消化后，培养基重悬成细胞悬液，并计数。

2.根据细胞生长快慢决定铺板细胞密度，每组3-5重复，根据实验设计决定铺板数量。

3.统一铺好后，待细胞沉淀下来后，在显微镜下观察各实验组的细胞密度，如果密度不均匀，则固定一组，微调其他组细胞的量再次铺板(如:发现NC组细胞较多，降低细胞量再次铺板)，放入细胞培养箱中培养。

4.铺板后第一天与第四天，配制2X(20uM)的EDU工作液,将37℃预热的2X的EDU工作液等体积加入96孔板中，是EDU终浓度变为1X，继续孵育细胞2小时，EDU标记细胞完成后，去除培养液，并加入1mL固定液，室温固定15分钟，去除固定液，每孔用1mL洗涤液洗涤细胞3次，每次3-5分钟，去除洗涤液，每孔用1mL通透液，室温孵育10-15分钟，去除通透液，每孔用1mL洗涤液洗涤细细胞1-2次，每次3-5分钟。用内源性过氧化物酶封闭液室温孵育20分钟，用洗涤液洗涤3次，每次3-5分钟。

5.EDU检测:每孔加入50uL的Click反应液，室温避光孵育30分钟，吸出反应液，用洗涤液洗涤3次，每次3-5分钟。

6.样品的显色 :在样品上加Streptavidin-HRP工作液，室温孵育30分钟。 用洗涤液洗涤3次，每次2分钟。加入0.1ml TMB显色液，室温孵育5-30分钟或根据显色情况孵育适当时间。直接在370nm或620-650nm测定吸光度。或加入25微升2M 终止反应，随后在450nm测定吸光度。

Edu染色服务

伊莱博生物科技（上海）有限公司，公司总部位于上海长江软件园。2022年1月与上海交通大学药学院成立联合研究中心，主要以生命科学研究为基础，专注于研究成果转化及技术服务创新，建立了包含肿瘤生物学、病理学、免疫学、细胞生物学、生物化学与分子生物学以及动物实验等学科的研究服务体系，为医学领域的发展做出了重要贡献。