ELISA试剂盒

      一.ELISA试剂盒采用双抗原一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被病毒性腹泻病毒抗体的包被微孔中，依次加入标本、HRP标记的检测抗原，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。用酶标仪在450NM波长下测定吸光度(OD值)，与CUTOFF值相比较，从而判定标本中猪病毒性腹泻病毒(BVDV)的存在与否。

　　二.方法类型和操作步骤

　　双位点一步法在双抗体夹心法测定抗原时，如应用针对抗原分子上两个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体，则在测定时可使标本的加入和酶标抗体的加入两步并作一步（图15-5）。这种双位点一步不但简化了操作，缩短了反应时间，如应用高亲和力的单克隆抗体，测定的敏感性和特异性也显著提高。单克隆抗体的应用使测定抗原的ELISA提高到新水平。

　　在一步法测定中，应注意钩状效应（hookeffect），类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象。当标本中待测抗原浓度相当高时，过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合，而不再形成夹心复合物，所得结果将低于实际含量。钩状效应严重时甚至可出现假阴性结果。

　　产品特点

　　一、、灵敏、特异的抗体;

　　二、稳定的重复性和可靠性;

　　三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体;

　　四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;

　　五、节省实验经费。

　　ELISA试剂盒回收率是反应待测物在样品分析过程中的损失的程度，损失越少，回收率越高，如果作标液1PPM，就是1毫克/升，而作出标准数据为0.99毫克/升，就是说你的回收率是99%，这个与真实成分有密切的关系，说明方法的准确度。比如水中总无机氯含量测定，样品水中含有无机氯20mg/L，取100mL被测水样品，加入0.1mL浓度为10mg/mL的含无机氯标准样品，测定时忽略体积变化，如果测定出样品中无机氯为29.8mg/L，则认为回收率为99%。