细胞样本中甘油含量检测试剂盒
- 公司名称 上海信帆生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型号
- 产地
- 厂商性质 生产厂家
- 更新时间 2024/10/24 16:25:11
- 访问次数 1306
联系方式:莫经理13764793648 查看联系方式
联系我们时请说明是化工仪器网上看到的信息,谢谢!
供货周期 | 现货 | 应用领域 | 生物产业 |
---|
所有产品仅供科研使用,不能用于食用和医疗等
细胞样本中甘油含量检测试剂盒
适用范围:测定实体组织、细胞中的甘油浓度。组成 (105 次微板测定或 30 次 1 ml 比色杯测定):
(1) 裂解液 50 ml
(2) R1 试剂 16 ml
(3) R2 试剂 4 ml
(4) 4 mmol/L 甘油标准品 1 ml
4 ºC,储存 3 月。
所需设备:酶标仪、生化分析仪或 721、722 型可
见光分光光度计。佳工作波长 550nm,如无此波
长建议优先选用 570nm、次选 530、490nm。
一 组织细胞裂解
细胞(包括分化的脂肪细胞)裂解: 消化、离心收集细胞。或直接在培养皿内裂解。通常6孔板单孔约2x106个细胞,75cm2瓶约1x107细胞。按比例每 1~2 x 106细胞加 0.1ml 裂解液,混匀,静置 10 分钟。
动物组织裂解:
切记要预先将新鲜组织切称重后再进行保存。组织冻存后再进行解冻、剪切、称重可能会产生严重的测量误差。离心管精确称重,加入组织块后再称重,二者相减(即减量称重法)计算组织量(约 100mg)。强烈建议按比例每 1mg 组织加10µl裂解液以减少样品间蛋白和脂质含量变异而产生的误差。(注意;裂解液用量在 1ml 或更多可保证有效的裂解与脂质提取)。用电动高速匀浆器或手动玻璃匀浆器破碎组织。(不推荐超声方法,因其不能*和均匀破碎。应根据预实验调整初始的组织细胞加入量),而后,静置 10 分钟。
二. 裂解液处理:
1. 取适量上清液转移到 1.5ml 离心管中,进行步骤
2 的操作。余下的裂解液可用 BCA 法蛋白定量试剂盒进行蛋白定量或-20ºC 储存。
2. 70ºC 加热 10 分钟灭活脂肪酶,可能出现絮状沉淀。
3. 室温 5000rpm 离心 5 分钟,上层清液即可用于酶学测定。
三 工作溶液配制:按 4:1 比例,取 4 ml 试剂 R1 与1 ml 试剂 R2 混合即可,立即使用或 4ºC 保存<1 天,变色弃去。(注意:谨防来源不明但容易发生的甘油污染,可来自操作者本人或标准品液体微粒溅射等。)
细胞样本中甘油含量检测试剂盒