shRNAx2.0 基因干扰稳转试剂盒

| 产品名称：HyCyte™基因干扰稳转试剂盒

| 产品货号：shRNAx2.0

| 产品介绍

第二代HyCyteTM基因干扰稳转试剂盒 (shRNAx2.0)是基于海星生物的位点特异性SSR重组酶技术开发的基因干扰稳转试剂盒。

产品特点：利用SSR (Site-specific Recombinase)重组酶实现干扰序列载体高效稳转，大幅提升了干扰效率。试剂盒的转染操作与siRNA转染操作一样，构建与病毒一样的基因干扰稳转细胞株，是新一代的基因干扰技术产品。

干扰试剂盒包括了人(Human)和小鼠(Mouse)基因组的所有基因，shRNAx2.0试剂盒包含2个优选的shRNA干扰序列载体、1个表达GFP/对照shRNA干扰序列载体和1管位点特异性SSR重组酶，通过SSR重组酶高效催化shRNA载体整合到细胞的基因组中，实现shRNA 片段的细胞稳转效果；同时由于SSR重组酶整合效率*，shRNA 片段在目的细胞基因组大约含有10~100个拷贝，高拷贝数大幅提升了shRNA 片段的表达效果，从而提升了基因的干扰效果。shRNAx2.0载体包含有puro抗性基因和GFP荧光基因，可以轻松通过荧光判断干扰载体的转染效率和目的载体表达效率，并通过Puromycin药物筛选，获得高表达的细胞株，轻松建立基因干扰稳转细胞株。shRNAx2.0干扰稳转试剂盒的操作与siRNA转染过程一样简单，对各种细胞都有非常好的干扰效果，也适用于间充质干细胞（MSCs）等的基因功能研究。

| 产品优势特点

比病毒法更简单——对分裂细胞和非分裂细胞都有非常好的干扰效果

细胞稳转效率高——仅需1~2周便可以拿到长期稳定干扰的细胞株

| 产品构成

| 产品原理

HyCyte™基因干扰稳转试剂盒 (shRNAx2.0)的干扰效率与传统病毒法干扰效率相当。因其 SSR重组酶可以构建高拷贝“稳转”细胞株，同时可以通过药物筛选到高效、稳定的干扰稳转细胞株。shRNAx2.0试剂盒是除了病毒法之外  可以轻松获得稳定干扰的稳转细胞株的实验方案。

使用HyCyte™基因干扰稳转试剂盒 (shRNAx2.0)构建干扰稳转株的周期仅1~2周，便可以拿到长期稳定干扰的细胞株，是大幅提升实验速度的方案。

| 应用流程

HyCyte™基因干扰稳转试剂盒 (shRNAx2.0)操作步骤(脂质体转染法)：

本试剂盒可以采用的转染试剂是Lipofectamine® 2000 Reagent (cat#11668-030)，具体参照转染试剂每种细胞情况。不同类型的转染试剂，请按照制造商的操作说明进行转染。

注意：悬浮细胞不推荐使用脂质体转染法。

HyCyte™基因干扰稳转试剂盒 (shRNAx2.0)操作步骤(电转化法)：

本试剂盒可以Neon转染系统，具体参照设备对每种细胞参数。不同类型的电转设备，请按照制造商的操作说明进行优化。

注意：悬浮细胞推荐使用电转化法。

HyCyte™基因干扰稳转试剂盒 (shRNAx2.0)配有GFP对照shRNA载体，可以按照实际使用的方法和细胞情况，进行实验摸索，建议48小时后的目的细胞的GFP的阳性率不低于50%， shRNAx2.0试剂盒才能获得好的效果。