CNGS-R-0005 高通量测序产物纯化及片段筛选磁珠

高通量测序产物纯化及片段筛选磁珠

产品名称：CleanNGS-R-5 ml    货号：CNGS-R-0005

产品纯化流程：

1.NGS文库或PCR产物体系中加入CleanNGS磁珠，核酸片段将结合到磁珠上。

2.在磁力架上吸附磁珠，移除上清。

3.加入70%乙醇洗涤磁珠两遍。

4.加入ddH2O或TE洗脱DNA，在磁力架上吸附磁珠，上清即为PCR纯化产物。

片段筛选流程：

1.向溶液中加入上一轮分选CleanNGS磁珠，涡旋混匀或用移液枪吸打混匀。

2.将体系置于磁力架.上，吸附磁珠。

3.待溶液澄清后，转移.上清至干净的离心管中。

4.向溶液中加入第二轮分选CleanNGS磁珠，涡旋混匀或用移液枪吸打混匀。

5.在磁力架上吸附磁珠，移除. 上清。

6.加入80%的乙醇洗涤两次。

7.加入ddH20溶解DNA，在磁力架上吸附磁珠，上清即为片段筛选产物。

CleanNGS vs AMPure^XP

所有样本一致

采用Aglient TapeStation 2200进行浓度和片段大小分析

- 1.8x 磁珠纯化:

纯化回收所有范围的片段大小

一1.0x bead purification:

去除引物和小片段扩增产物

0.65x - 0.25x bead purification:Size selection

双端选择，去除大片段也去除小片段

总RNA纯化-CleanNGS

总RNA浓度为500 ng/μL和50ng/μL的样本，样本量均为10ul,按照说明书推荐的protocol平

行测定3次。纯化后20ul洗脱，采Agilent's TapeStation 2200测定，结果如图。总RNA的回收率为86-94%。

PCR产物纯化( CleanNGS/ CleanNGS-R vs AMPureXP )

高通量测序产物纯化及片段筛选磁珠

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