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时间分辨荧光微球(羧基)偶联使用方法

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山东绿都生物科技有限公司成立于2005年,坐落于孙子故里山东省滨州市,位于山东省滨州国家级经济技术开发区黄河二路169号绿都生物工程高科技园内,占地面积66600多平方米,是投资2.6亿元以上按照国际兽药GMP标准兴建的新型兽用生物制品高科技企业。  

在各级政府部门、国内外客户、社会各界关心支持下,全体员工团结拼搏,公司迅速成长为世界畜禽用蜂胶疫苗研发生产基地、国家政府采购猪瘟疫苗定点生产基地、国家发改委绿色农用生物制品产业化项目示范基地、滨州国家农业科技示范园区综合示范园区、中国兽药产业十大著名品牌、中国科技创新型中小企业100强、山东省高新技术企业、山东省重合同守信用企业、山东省扶贫龙头企业、农业产业化省级重点龙头企业……公司的科学跨越发展,引起了国内外各方面的密切关注,国内外有关机构指出:“绿都生物是一个具有自主创新研发能力,并能够研制生产出兼具创新性和高性价比产品的公司” ;“绿都生物是一个全球有投资发展前景的生物技术公司之一”。  

公司新建了包括组织毒、胚毒、细胞毒、细菌毒四条灭活疫苗生产线和组织毒、胚毒、细胞毒、细菌毒四条弱毒疫苗生产线、诊断液、精制卵黄抗体二条生产线,生产工艺先进合理,涵盖了蜂胶、氢氧化铝胶、白油三大佐剂系列产品。是世界上绿色环保型畜禽用蜂胶疫苗研究开发生产基地。公司还建有5000多平米的动物实验室。公司拥有自动高密度发酵系统、细胞生物反应器、自动收获接种机、汉显智能箱体孵化机、微电脑液体灌装机、大型冻干机等200余台件先进生产设备和精密电子天平、冷冻高速离心机、PCR仪、凝胶成像系统、荧光显微镜、倒置显微镜等100余台精密监测仪器。设计生产能力为年产各种生物制品200多亿头羽份。2006年8月20日一次性高分通过农业部兽药GMP验收,20225月顺利通过农业部新版兽药GMP复验收。

食品安全检测事业部成立于2011年,秉承“品质至上、客户第一、追求卓越”的生产服务宗旨,“自强不息、艰苦奋斗、务实创新、追求卓越”的精神,不忘初心,目标坚定,做最好的产品,服务于行业客户。食品安全检测事业部现有保健品类、激素及类固醇类、重金属类、喹恶啉类、消炎镇痛类、水产违禁类、牛羊马类、农药毒品类、禽病类、生理活性物、体外诊断IVD炎症、细菌含传染病类等多个品种。

主要产品有真菌毒素免疫亲和柱、真菌毒素嵌合酶联免疫检测试剂盒、真菌毒素胶体金定性检测卡、量子点定量检测卡、食品安全定量/定性检测箱、食品安全抗原及单克隆抗体、单克隆及多克隆抗体制备试剂耗材及相关仪器、食品安全与动物疫病类抗原及单克隆抗体等约1200种,部分产品已经出口到德国、俄罗斯、伊朗、英国、美国等多个国家。

地址:山东省滨州市国家经济技术开发区黄河二路169号 绿都生物工程高科技园

邮编:256600  抢购热线:18266598399武经理 同微信

0543-3418283;  400-636-7188 

疫苗、兽药,食品安全检测抗原抗体试剂盒 、亲和柱、检测卡、生产原材料,动物疫病检测抗原抗体检测卡试剂盒

供货周期 现货 应用领域 生物产业

时间分辨微球(羧基)偶联方法

粒径: 100nm-300nm

激发/发射:365/610nm

.  时间分辨荧光微球(羧基)偶联使用方法微球的清洗

一般取 1mg 微球(10mg/ml) 标记 0.1mg 抗体,不同项目可进行两边浓度摸索优化。

具体操作流程如下:

1.100ul 微球 + 900 ul 标记缓冲液50mM MES,pH 6.0或者0.05MPBS,pH 6.0

2.17000rpm,离心 20min,第一遍;

3.去掉上清,用 1000ul 标记缓冲液重悬微球;

4.17000rpm,离心 20min,第二遍;

5.去掉上清,用 1000ul 标记缓冲液重悬微球离心后微球重悬可使用水浴超声仪,建议功率 500-700W,超声时长 2-5min,下同,备用。

.  时间分辨荧光微球(羧基)偶联使用方法微球的活化

各称取 20mg NHS  EDC,用标记缓冲液溶解,现用现配,即 20mg/ml NHS  EDC; 20ul NHS,加入到清洗后的微球中,快速混匀;

然后再取 5ul EDC 加入到微球中,快速混匀; 室温孵育,20-30min。

.  清洗去除残留 EDC将活化后的微球:

1.17000rpm,离心 20min,第一遍;

2.去掉上清,用 1000ul 标记缓冲液重悬微球;

3.17000rpm,离心 20min,第二遍;

4.去掉上清,用 1000ul 标记缓冲液重悬微球,备用。

IV.  微球与抗体的偶联

0.1mg 抗体溶解于50mM MES,pH 8.5或者0.05MPBS,pH 8.5 2ml 离心管中,加入活化后的微球,快速混匀后,室温孵育,3 小时。

.  封闭

配制 20mg/ml  BSA,即称取 20mg BSA,用终浓度 100mM 乙醇胺溶液充分溶解,备用。

微球标记抗体后,加入 100ul 上述封闭液 BSA,室温孵育 1 小时。 .  去除未结合的抗体

此步骤目的是通过高速离心的方法去除游离的未结合微球的抗体;

具体流程如下:

1.17000rpm,离心 20min,第一遍;

2.去掉上清,用 1000ul 稀释液50mM PBS,pH 7.4  50mM Tris,pH 8.0)重悬微球;

3.17000rpm,离心 20min,第二遍;

4.去掉上清,用 1000ul 稀释液重悬微球,即为抗体-微球标记复合物,4℃放置备用, 如长期保存需加入终浓度为 0.2% BSA 和 0.02% NaN3 溶液。

 

注意事项

1. 保存条件:本产品需要于 2-8℃保存,切勿冷冻;

2. 本产品在使用前确认处于均匀的悬浮状态,有轻微结块可以用超声去除;

3. 本产品活化后建议立即进行偶联实验,活化状态不宜长时间保存;

4. 本产品仅供科研使用。




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