蛋白芯片定制检测服务实验操作流程

蛋白芯片定制检测服务实验操作流程

实验技术简介:

蛋白芯片是一种高通量监测系统，通过靶分子和捕捉分子相互作用来监测蛋白分子之间的相互作用。捕获分子--般都预固定在芯片表面，由于抗体的高度特异性和与抗原强结合特性所以被广泛的用做捕获分子。对于研究蛋白芯片的研究在芯片表面有效固定抗体是非常关键的，特别是在固定抗体-致性方面非常关键对于增强蛋白芯片的灵敏度。G蛋白是一种抗体结合蛋白, 他特意结合抗体FC片段,因此已被广泛的用于固定不同类型的抗体。

实验技术原理:

蛋白芯片技术的基本原理是将各种蛋白质有序地固定于滤膜、载玻片等各种载体上成为检测用的芯片。然后，用标记了特定荧光素的抗体或其他成分与芯片反应，经清洗将未能与芯片上的蛋白质互补结台的成分洗去，再利用荧光扫描仪或激光共聚焦扫描技术，测定芯片上各点的荧光强度，通过荧光强度分析芯片上成分与待检溶液中成分之间相互作用的关系，由此达到测定目的。

实验操作流程: .

1、客户提供生物样品(抗原或者抗体),验收。

2、配制点样液，使用Smartarrayer点样仪进行点样。

3、芯片固定，若无后续实验，芯片交付客户。

4、芯片反应实验。

5、芯片扫描及数据分析。芯片清洗后，用LuxScan 10K-A Cy3通道扫描，并提取数据进行分析。

6、提供结果报告(包括杂交图片、数据结果及相应聚类和差异分析等结果)。

客户提供:

1、实验对象为组织样品，取适量(50-100mg) 新鲜组织样品或正确保存的组织样品，使用

BioPulverizerTM冰冻粉碎组织，加1m的RNA抽提试剂TRIzol (Invitrogen) ,使用Mini-Bead-Beater-16匀浆后抽提RNA。

2、实验对象为细胞样品，每份样品取1x106~ 1x107细胞，加1m的RNA抽提试剂TRIzol (样品为贴壁细胞，每10cm2培养皿TRIz0I使用量为1ml)，裂解后抽提RNA。

交付标准:

1、芯片检测数据

2、完整的实验操作规程、实验报告(含软件分析结果)以及实验材料

实验代做服务：