Oligo 氨气氨解仪

DNA合成氨气氨解仪是为有效制备生物样品而设计的，用于PCR引物、探针和组分生产，DNA测序、DNA和RNA合成、随机启动、载体设计、DNA指纹和人工基因合成。是DNA/RNA/寡核苷酸脱保护基快捷高效稳定的解决方案。

DNA合成氨气氨解仪特点：

反应器容量：10升容量

样品数量：6至10个，每个样品有96位。

温度范围:*200°C

功率输出：1200瓦

符合CE标志

保修12个月

电源：220 V至240 V/50/60 Hz

*功耗：2500瓦

显示屏：彩色触摸屏

尺寸:W x D x H 52 x 73 x 123厘米（无终端）

重量：180公斤

采用Oligo高压微波氨解仪，一次性可以氨解960个样品并直接得到干燥的样品，氨解时间也大大缩短。

传统的氨解步骤如下，费时费力：

一．     氨解前的准备

1. 检查纯化所需材料及试剂是否充足。、

2. 活化C18板（柱） 向C18板加满0.5M NaCl，抽干，重复平衡3次，再加满分析纯，抽干5次以上，后以洗脱速度离心。洗脱后再向C18板内加满0.5M NaCl，抽干，重复3次，完毕再向C18板内加满0.5M NaCl以待用。C18柱活化，首先用20ml分析纯活化C18一次，吹干甲醇，然后用10ml NaCl平衡1次以待用。

3.制板灌胶 计算好预用分析板及电泳板数量以灌胶。胶液制作，每块板需50ml左右的16%的胶（短链，16%；长链，12%），每块板平均加入过硫酸铵100ul，TEMED 30ul(依情况而定，可适量增减)，摇晃，混匀，倒入板中，水平放置，使胶凝固。注意板中不能有气泡，并注意补胶。

注意事项：①所用C18板需定期进行维护与检测。

②每一瓶新制胶使用之前需对胶跑Marker以保能正常使用。

二．     氨解

原理：切割—将合成好的寡核苷酸链从支持物上化学切割下来。用冰氨水来裂解CPG

连接化合物与初始核苷间的酯键。断裂下来的寡核苷酸带有自由的3‘羟基。

   脱保护基—用冰氨水处理较长时间以脱掉碱基环上的氰乙基、苯甲酰基、异丙基等保护基团。

1.    单管氨解

①    将合成好的柱子用注射器针头将CPG或树脂粉末全部倒入氨解瓶中，并将对应的标签贴在氨解瓶上。

②    加入冰三乙胺100ul，冰氨水1.5ml，盖紧瓶盖，放入80度烘箱氨解2小时。对用快速氨解单体合成的序列直接加氨水后55度2小时即可。在生产操作表上准确记录开始氨解的时间。

注意事项:①在将引物放入氨解瓶时,要核对清楚标签,要一一对应。

         ②三乙胺与氨水顺序要防止加反。(加反后会出现分层现象)

        ③氨解中使用的氨水必须是冰冻状态中的氨水。
2.      96孔板氨解

①55度氨解

对好标签，向合成板内加入适量的乙氰放在垫板上，重量平衡，高速离心。（对于3900，离心完后需用注射器针头将砂芯勾出）离心完后，将垫板换成正面贴有对应轮次标签的氨解板上。放入通风橱。先向合成板每孔加入50ul三乙胺，再向每孔加入250ul氨水，用胶带封好放入氨解盒中，在操作单上登记好时间和氨解人，放入55度烘箱氨解40min。 

②80度氨解

40min后取出，放入通风橱赶氨1min，高速离心。拿去合成板用20ul小枪取小样20ul；在向氨解板每孔内加入冰氨水200ul，封好胶带，用夹板夹好，登记好时间，放入80度烘箱氨解2h。

注意事项:①务必在氨解板正面贴上该轮次标签,然后再位置一一对应垫再合成板下面,一起氨解,离心。

         ②三乙胺与氨水顺序要防止加反。(加反后会出现分层现象)

        ③氨解中使用的氨水必须是冰冻状态中的氨水。

        ④夹板密封时要注意拧紧,防止出现漏氨。