pGM-Simple-T Fast克隆试剂盒

pGM-Simple-T Fast Vector是基于pGM-T Vector改良的一种高效克隆PCR产物的载体，经由克隆质粒在XcmI内切酶酶切后得到的带3’ T突出末端的线性化载体，通过该方法产生的带有3’ T突出末端的线性化载体效率远高于传统酶切加尾法。由于大部分耐热聚合酶反应时都会在PCR产物的3’端添加一个A，可与pGM Simple -T Fast Vector 3’端的T互补连接。此外，pGM-Simple-T Fast Vector突变掉pGM-T Vector的多克隆位点，以方便自行引入酶切位点。

试剂盒中配备了新型的RapiLigation Mix（目录号：RT407）为高效的T4 DNA连接酶反应试剂，其中含有连接增强剂、酶稳定剂，可大大缩短连接时间、提高PCR产物的连接和克隆效率。按不同需要配备了DH5感受态细胞以及对照用超螺旋质粒，方便进行转化。带有插入片段的重组子可根据α互补原理，进行蓝白斑筛选，判断载体中有无外源基因的插入（白色克隆为阳性重组克隆，蓝色的为载体自连的克隆，具体筛选原理参考分子克隆等书籍）。克隆后，可使用通用引物T7、SP6进行鉴定和测序。

产品特点

高效快速： 5 min快速连接，阳性率近100%。

灵敏广泛：适合低至0.025 pmol浓度片段和长至8 kb片段的高效连接。

无多克隆位点： 载体自身无多克隆位点，方便自行引入酶切位点。

载体图谱

pGM-Simple-T Fast Vector多克隆位点