六胺银染色

六胺银染色

染色步骤：1、石蜡切片脱蜡至水。2、重铬酸钾溶液浸泡过夜（需用重铬酸钾溶液浸泡过夜否则细胞核极易着黑色影响观察）。3、水洗2min4、1%的高碘酸氧化15~20min（此时配制工作液，并将工作液放置56℃烤箱预热）5、流水冲洗5min，再用蒸馏水洗2次6、切片用阻水笔画圈，滴加预热的工作液，放入湿盒中加盖（湿盒中要加入少量水，防止染液在长时间加热时蒸发变干）7、40分钟后要将切片拿出在镜下观察（观察时工作液不用洗去）肾脏则以肾小球毛细血管基膜出现黑色为准，如果着色不够深，则继续放入烤箱孵育；肺则以真菌变为黑色为准（有的肺组织无真菌，则以同组有真菌的肺做参考，如果都没有真菌则以支气管变黑为标准）。

六胺银染色以后每隔10分钟取出切片在镜下观察，直至染色结果满意为止。8、蒸馏水稍洗9、5%的硫代.硫酸钠处理5min10、伊红复染(在HE染色中的伊红后面脱水的*缸中染伊红为佳，伊红复染不用染太深）直接在伊红后面的酒精脱水，透明，封片。染色结果：肾小球囊基膜、肾毛细血管球基膜和肾小管上皮基膜呈黑色。真菌、弹性纤维和网状纤维也呈灰黑色或棕黑色。 注意事项1、六铵银储备液配妥后应置于4℃的冰箱内，一般可以保存6个月，如果室温仅可保存2周。六铵银工作液仅能使用一次；2、肾基膜比真菌等较难显色，因而在60℃温箱中作用的时间也较长；肾小管基膜一般比肾毛细血管球基膜显色早，但应以后者作为标准，肾毛细血管球基膜呈黑色而背景呈淡棕黄色为宜；3、在低倍镜检时，菌体不宜着色太黑，否则在高倍镜下观察则不够清皙透亮，在菌体密集成堆的地方显色更要适当；4、切片入六胺银染色之前必须用蒸馏水浸泡洗涤，不能用自来水，否则易出现沉淀。染色用滴染法好控制染色并且要求较低，如果用浸染法所有与试剂接触的玻璃缸必须用蒸馏水清洗干净。另外浸染法需要的试剂较多而且玻片在显影液中及易出现银镜反应使整个玻片变黑很脏影响美观并且不易控制显色。

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