U-937 人组织淋巴瘤细胞株
- 公司名称 上海昱都生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型号 U-937
- 产地
- 厂商性质 经销商
- 更新时间 2016/6/13 9:25:04
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人组织淋巴瘤细胞株
质量控制: 本产品经过了细菌、真菌、霉菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原体检测。
用途:本产品仅可用于科研实验,不得用于其他。
说明:我司专业提供ATCC细胞,WK256,大鼠肉瘤细胞状态好,提供各种细胞服务(复苏、等)。我们现货供应细胞株、细胞系多达4000多种产品,您可放心采购。
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人组织淋巴瘤细胞株 常见问题及解决方案
1)培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞*可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。
2)细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。
细胞传代
1.当细胞融合度达到90%以上时,给细胞传代;
2.37°C水浴预热培养基(RPMI1640+10% FBS);
3.在超净台中,弃培养基,加入2-5mlPBS清洗细胞后,再加入1ml胰酶消化细胞;
4.显微镜下观察到细胞变圆,有细胞开始脱离瓶壁时,加入5ml培养基(RPMI1640+10% FBS)终止消化;
5.用移液器轻轻吹下瓶壁上剩余的细胞,并轻轻吹打将细胞吹散;
6.将细胞移入离心管中,1000rpm离心5min;
7.弃上清,加入15-20ml的培养基(含血清)重悬细胞后转入T75培养瓶中或按适当比例传到T25瓶中(确保细胞贴壁后融合度在25-50%之间),细胞密度在1×104 cells/cm2 (2.5×105 cells/T-25瓶),混匀细胞悬液,确保细胞均匀分布;
8.将培养瓶置于37°C,5% CO2的无菌培养箱中培养。
细胞冻存
1.37°C水浴预热培养基(RPMI1640+10% FBS);
2.消化细胞后给细胞计数:
1)洗净晾干血小板计数板和盖玻片,将盖玻片*覆盖计数区;
2)充分混匀细胞,取少量(0.1-0.5ml)细胞悬液与等体积的染色液台盼蓝混合,移液器吹吸混合均匀,用移液器取20ul混合液从盖玻片两端(与中间凹槽平行的两端)分别打入细胞,以细胞悬液刚好浸湿盖玻片为佳;
3)显微镜下,数四个计数区的总细胞数,无活性细胞染成蓝色,活细胞不被染色;
4)细胞密度=细胞总数/4×10000×2;
这里10000是不变的,因为计数的细胞是在体积为1mm×1mm×0.1mm即10-4cm3计数池内,1cm3=1ml,将四个计数区的细胞数除以4取平均数,乘2是补偿加等体积台盼蓝形成的稀释。
5)细胞活性=活细胞数/细胞总数×*。
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