DAS型系列双波长低压液相色谱分离层析系统

低压液相色谱分离层析系统适用范围：生物化学、合成化学、天然产物、药物开发、食品化学、农业化学、化妆品、聚合物与石化等行业的科研与制备。可进行离子交换层析、亲和层析　凝胶过滤层析、疏水作用层析等方法，用于 蛋白质、酶、核酸、核苷酸、多肽、（含/不含芳香族氨基酸）及其它任何有紫外吸收的生物/非生物样品的分离分析、流动检测，是生物分子纯化的理想选择，它具有功能多，使用简便，经济等特点。小巧的设计，zui大限度地节约冷库和实验室的空间。

 备注： 系统配置里的高性能双光束紫外检测仪的各项技术指标要求，是用在全国药厂的药物出厂定量检测之用。

仪器设备特点：

蛋白质280nm/254nm双波长测定

蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸。它们具有吸收紫外光的性质，其吸收高峰在280nm波长处，且在此波长内吸收峰的光密度值与其浓度成正比关系，故可作为蛋白质定性、定量测定的依据，正因为如此，280nm处的紫外吸收法通常被用于层析系统中蛋白质浓度的连续监控。但由于各种蛋白质的酪氨酸和色氨酸的含量不同，故要准确定量，必需要有待测蛋白质的纯品作为标准来比较，或且已经知道其消光系数作为参考。另外，不少非蛋白物质在280nm波长下也有—定吸收能力，可能发生干扰。其中尤以核酸（嘌呤和嘧啶碱）的影响更为严重。在280nm处的吸收比蛋白质强10倍（每克），但核酸在254nm处的吸收更强，其吸收高峰在254nm附近。核酸254nm处的消光系数是280nm处的2倍，而蛋白质则相反，280nm紫外吸收大于254nm的吸收值。

通常：

纯蛋白质的光吸收比值：A280/A254 >> 1.8

纯核酸的光吸收比值： A280/A254 << 0.5

因此蛋白质溶液中同时存在核酸时(生物体系大多数如此)，必须同时测定OD_254nm，与OD_280nm。然后根据两种波长的吸收度的比值，通过经验公式校正，以消除核酸的影响而推算出蛋白质的真实含量。

蛋白质浓度=1.45×A₂₈₀－0.74×A₂₅₄ (mg/ml)

此经验公式是通过一系列已知不同浓度比例的蛋白质（酵母烯醇化酶）和核酸（酵母核酸）的混合液所测定的数据来建立的。

系统的配置：