人肝细胞

人肝细胞培养基本概念：

　　细胞培养是指从体内组织取出细胞摹拟体内出现环境，在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下，使期生长繁殖，并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物为单个细胞或细胞群。

在医学遗传学研究中应用zui广泛的是外周血淋巴细胞、皮肤或纤维细胞和各种能在体外*生长的细胞系。外周血淋巴细胞培养具有时间短、技术简便、可重复取材等优点，它在临床染色体分析中使用zui广泛。体外培养细胞株可在培养过程中发生自发的或在外界作用下的转化，成为*细胞系，也可直接建成*细胞系，*细胞系能在体外无取制的传代和生长。*细胞系通常具有非整倍体细胞和各个细胞的核型不*相同特征。但细胞克隆的细胞系其这一特征可以不明显。

人肝细胞传代方法：注意：操作过程应严格无菌

1.悬浮细胞：勿需消化离心，可直接由孵箱内取出---直立静置1-3分钟---吸取上层培养基1/3-2/3 --- 加入新配制的培养基（含双抗和10%小牛血清）--- 传代即可。

2.半贴壁细胞：勿需消化离心，先倾出瓶内培养基---加入少量新配制的培养基（不含小牛血清）轻轻吹打均匀--- 加入新配制的培养基（应将吹打前加入的培养基体积考虑在内，使小牛血清浓度为10%，含双抗）--- 传代即可。

3.贴壁细胞：先消化离心---弃上清---加入少量新配制的培养基（不含小牛血清）轻轻吹打均匀--- 加入新配制的培养基（应将吹打前加入的培养基体积考虑在内，使小牛血清浓度为10%，含双抗）--- 传代即可。

消毒：

　　细胞培养的zui大危险是发生培养物的细菌，真菌和病毒等微生物的污染，污染主要是由于操作者的疏忽而引起，常见的原因有操作间或周围空间的不洁，培养器皿和培养液消毒不合格或不*，由于有关培养的每个环节的失误均能导致培养失败，故细胞培养的每个环节都应严格遵守操作常规，防止发生污染。

消毒方法分为三类： （A） 物理灭菌法（紫外线、湿热、过渣等）。 （B） 化学灭菌法（各种化学消毒剂）。 （C） 抗生素。

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