单核细胞
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- 公司名称 上海信裕生物科技有限公司
- 品牌
- 型号
- 产地 中国/美国
- 厂商性质 生产厂家
- 更新时间 2017/3/19 21:38:48
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单核细胞培养基本概念:
细胞培养是指从体内组织取出细胞摹拟体内出现环境,在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下,使期生长繁殖,并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物为单个细胞或细胞群。
在医学遗传学研究中应用zui广泛的是外周血淋巴细胞、皮肤或纤维细胞和各种能在体外*生长的细胞系。外周血淋巴细胞培养具有时间短、技术简便、可重复取材等优点,它在临床染色体分析中使用zui广泛。体外培养细胞株可在培养过程中发生自发的或在外界作用下的转化,成为*细胞系,也可直接建成*细胞系,*细胞系能在体外无取制的传代和生长。*细胞系通常具有非整倍体细胞和各个细胞的核型不*相同特征。但细胞克隆的细胞系其这一特征可以不明显。
单核细胞传代方法:注意:操作过程应严格无菌
1.悬浮细胞:勿需消化离心,可直接由孵箱内取出---直立静置1-3分钟---吸取上层培养基1/3-2/3 --- 加入新配制的培养基(含双抗和10%小牛血清)--- 传代即可。
2.半贴壁细胞:勿需消化离心,先倾出瓶内培养基---加入少量新配制的培养基(不含小牛血清)轻轻吹打均匀--- 加入新配制的培养基(应将吹打前加入的培养基体积考虑在内,使小牛血清浓度为10%,含双抗)--- 传代即可。
3.贴壁细胞:先消化离心---弃上清---加入少量新配制的培养基(不含小牛血清)轻轻吹打均匀--- 加入新配制的培养基(应将吹打前加入的培养基体积考虑在内,使小牛血清浓度为10%,含双抗)--- 传代即可。
消毒:
细胞培养的zui大危险是发生培养物的细菌,真菌和病毒等微生物的污染,污染主要是由于操作者的疏忽而引起,常见的原因有操作间或周围空间的不洁,培养器皿和培养液消毒不合格或不*,由于有关培养的每个环节的失误均能导致培养失败,故细胞培养的每个环节都应严格遵守操作常规,防止发生污染。
消毒方法分为三类: (A) 物理灭菌法(紫外线、湿热、过渣等)。 (B) 化学灭菌法(各种化学消毒剂)。 (C) 抗生素。
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