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[人肝癌细胞]PLC/PRF/5细胞传代的一般方法：

开始[人肝癌细胞]PLC/PRF/5细胞传代前，仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全：一般主要有：[人肝癌细胞]PLC/PRF/5细胞(单层细胞，镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH培养液或MEM培养液或199等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液（1万单位）、7.5％NaHC03溶液、0.25％胰蛋白酶、PBS洗液。

[人肝癌细胞]PLC/PRF/5细胞技术步骤：

①将对数生*的[人肝癌细胞]PLC/PRF/5细胞浓度调整为1~10×104细胞/ml，按103~104个细胞接种于96孔板，每孔100 μl；

②培养[人肝癌细胞]PLC/PRF/5细胞24小时后，对其进行不同处理，每个处理设三个平行对照；

③（MTT法）：适当培养时间后，取出[人肝癌细胞]PLC/PRF/5细胞，倒掉培养液，每孔加入5 mg/ml新鲜配制的MTT溶液，温育4小时，再次倒掉上清液，每孔加入200 ml DMSO，摇匀后，酶标仪检测吸光值。

（台盼蓝拒染法）：适当培养时间后，收集细胞，经台盼蓝染色，在倒置显微镜下计数蓝染及不染色细胞，计算细胞存活率。

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