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微生物耐热大肠菌群培养基成品试剂使用说明书

 方法：MFC 培养基滤膜法

 方法来源：GB/T5750-2006

应用范围：饮用水、出厂水、水源水、废水、泳池水等

测定步骤：

◆注意：为防止收到空气、辅助实验器皿、操作人员等环节带入细菌污染，请在无菌环境下 操作并做好各环节的灭菌工作。

1 、将滤膜放入沸水中 煮沸灭菌 3 次，每次 15 分钟。每次均需换 水。灭菌后备用。

2、将试剂放入沸腾的水 中（锅里放有铁架） ， 将培养基煮至融化完全 后，取出备用。

3、在酒精灯上将无菌 培养皿取出。

4、待步骤 1 培养基冷却 至 50℃左右，在酒精灯 上方，将培养基导入培 养皿中。

5 、立即将培养皿平放 于 台面上 ，旋摇培养 皿 ，将培养基放至凝 固，备用。

6 、用点燃的酒精棉球 火焰将杯盖、滤杯、滤 膜底座和镊子灭菌。

7、用灭菌的镊子夹取一 片步骤 1 的无菌滤膜， 夹住边缘，平贴到滤膜 底座上。

9 、取下滤杯，用灭菌 的镊子取下滤膜。

8 、安装好抽滤装置，倒 入 100mL 混匀的水样并 抽滤，水干后再抽 5 秒即 可停止

9 、取下滤杯，用灭菌 的镊子取下滤膜。

10、将滤膜平铺于已经凝固的步骤 5  的培养基上，细菌截留面朝上，避免 出现气泡。翻转培养皿，置于44.5℃ 恒温培养箱内培养 24 小时±2 小时， 记录蓝色菌落数。

  提示：若特征菌落数过多，则将水样稀释适当倍数，经过稀释的水样，最终结果需乘以 稀释倍数。水样稀释、过滤及接种操作均为无菌操作。

  提示：若需做一平行样，只需将平行的滤膜铺于同一块培养皿中即可实现。

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