保存温度
-20℃保存
注意事项
1、长期存放请分装后-20℃保存。
2、避免反复冻融。
3、冻存后溶解时注意重新混匀。
2、避免反复冻融。
3、冻存后溶解时注意重新混匀。
有效期
一年
仪器准备
1. 细胞培养设备
2. 离心机
3. 移液器
4. 冰箱
5. 冰盒
2. 离心机
3. 移液器
4. 冰箱
5. 冰盒
试剂准备
1.PBS 缓冲液 或者HBSS
耗材准备
1.离心管
2.吸头
2.吸头
使用注意事项
1.尽量减少反复冻融的次数,以免失效。
2.在使用溶液的过程中,要特别注意避免溶液被细菌污染。
3.溶液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
4.以下步骤仅供参考,以实际使用习惯为准。
2.在使用溶液的过程中,要特别注意避免溶液被细菌污染。
3.溶液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
4.以下步骤仅供参考,以实际使用习惯为准。
使用方法
1. 贴壁细胞的消化:
(1) 吸除培养液,用无菌PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
(2) 加入少量溶液,略盖过细胞即可。室温放置0.5~2min,不同的细胞消化时间有所不同。
(3) 显微镜观察,如果细胞明显收缩并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪头吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除溶液。加入含血清的细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
(4) 如果发现消化不足,则再加入溶液重新消化。
(5) 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用溶液把细胞全部吹打下来。1000~2000g离心1min,沉淀细胞,尽量去除溶液后,加入含血清的培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2. 组织的消化:
不同的组织需要消化的时间差异很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
(1) 吸除培养液,用无菌PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
(2) 加入少量溶液,略盖过细胞即可。室温放置0.5~2min,不同的细胞消化时间有所不同。
(3) 显微镜观察,如果细胞明显收缩并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪头吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除溶液。加入含血清的细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
(4) 如果发现消化不足,则再加入溶液重新消化。
(5) 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用溶液把细胞全部吹打下来。1000~2000g离心1min,沉淀细胞,尽量去除溶液后,加入含血清的培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2. 组织的消化:
不同的组织需要消化的时间差异很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
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