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高通量DNA合成仪

Oligo高通量DNA合成仪特点：
l 包括一个灵活的合成协议编辑器，它允许操作员修改所包含的协议，并将它们保存在一个新名称下，或者从头开始编写协议。协议编辑可以在Excel中完成。对于不同的合成规模和序列长度，很容易编辑特殊协议。比如，可以给耦合缓慢的碱基对一个特别的延长的耦合时间。如果必要的话，可以给所有单体额外的耦合反应时间。
l 软件简单易用。在计算机或平板的Excel表中

l    软件简单易用。在计算机或平板的Excel表中创建运行数据后，可使用Wi-Fi等网络连接或标准U盘传输到仪器上。实验运行中，可以从PC端收集实验数据监测实验结果。  

l    性能

OligoMaker X12可以在1小时内平行合成12条20对的寡核苷酸。

OligoMaker 48可以在2小时内平行合成多达48条20对的寡核苷酸。

OligoMaker 96可以在3小时内平行合成多达96条20对的寡核苷酸。

OligoMaker 192可以在4小时内平行合成多达192条20对的寡核苷酸。

l    可在IUPAC-IUB标准规则下合成10、50、200和1000nmol规模的核苷酸。

两个反应盘，一个盘可以加载和合成核苷酸，另一个盘准备进行净化步骤。

OligoMaker 48可以升级为OligoMaker 96和OligoMaker 192；

OligoMaker 96可以升级为OligoMaker 192。

DNA的固相合成。即DNA3'端固定于基质上，然后沿3'向5'方向依此添加核苷酸直至合成所需的DNA片段。不同于应用DNA聚合酶的DNA合成。

合成过程
*个碱基的3‘末端固定在树脂上，下一个碱基的5’-OH用二对甲氧三苯甲基DMT保护，碱基上的氨基用苯甲酸保护，然后对3‘-OH用氨基磷酸化合物进行活化。
1。1个碱基的5’-OH和下个碱基的3‘-OH形成亚磷酸三酯，
2。然后用碘氧化成磷酸三酯
3。加入C2H6CL2除去第二个碱基5’-OH上的保护剂DMT
循环进行加入下一个碱基
合成完毕后

亚磷酰胺寡核苷酸合成为例介绍该类仪器的一般操作步骤。亚磷酰胺DNA合成的试剂有：保护碱基的5／—DMT，A、G、C、T亚磷酰胺单体，四唑偶联催化剂，乙酐，N—甲基咪唑封闭试剂，TCA脱保护溶液，12氧化混合物，乙腈清洗溶剂，氨水切除溶液。使用步骤如下：

1、仔细检查合成仪上所有试剂瓶中的试剂量，必要时换掉试剂瓶，特别注意乙腈的量，因为该溶剂用量较大。

2、将标记好的清洁的收集瓶装在合成仪上。

3、将要合成的DNA序列输入合成仪。

4、检查选择的合成步骤是否正确。

5、选择结束方法：TritylOffAuto是仪器的原始状态，若打算以5，—DMT基团连接纯化寡核苷酸，将其转变为TritylOnAuto结束状态。

6、选择结束方法，一般为系统的原始状态。

7、在每个柱监视器的Username下，输入你所希望的保存名字。

8、以代码代替相应的DNA序列标记每一个收集瓶。

9、打印出每一个柱设置的详细资料。

10、检查打印出来的资料是否正确。

11、运行StartColumn步骤检查每一个柱的位置，确保合成仪上合成柱处于正确的位置。

12、检查连接在合成仪上的溶剂残留（废液瓶）是否充满。

13、如果分部收集器用来收集每个DMT脱保护步骤的流出物，确保试管充分清洁干净，并打开分部收集器，确保DMT废液管路通向分部收集器。

14、启动循环，运行开始程序清洗试剂管路，除去原来的试剂。

注意：TritylOnAuto表示在合成寡核苷酸的5’端核苷酸带有一个DMT，并将其从固相载体上切下来，储存在收集瓶中；TritylOffAuto表示在合成寡核苷酸的5，端核苷酸没有保护基团，将其从固相载体上切下来，储存在收集瓶中；TritylOnManual表示合成寡核苷酸的5’端核苷酸带有一个DMT，寡核苷酸没有从固相载体上切下来，而是保留在合成柱中；TritylOffManual表示在合成寡核苷酸的5，端核苷酸没有保护基团，寡核苷酸没有从固相载体上切下来，而是保留在合成柱中。