猪蓝耳病抗体试剂盒
1 抗原预包被板条 1块 7 终止液 6ml
2 酶结合物 12ml 8 阴性对照 800μl
3 10倍浓缩洗涤液 50ml 9 阳性对照 800μl
4 底物A液 6ml 10 血清稀释 1块
5 底物B液 6ml 11 封板膜 2张
6 样本稀释液 50ml 12 说明书 1份
猪繁殖与呼吸综合征（Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS）病毒抗体检测试剂盒用于检测猪血清中的PRRS抗体，评估养猪场PRRS疫苗免疫状况及感染猪的血清学辅助诊断。
需自备的设备及试剂
微量移液器： 0.5μl～10μl、10μl～100μl、100μl～1000μl。 一次性移液器吸头。 量筒：500ml。 96孔板酶标仪。 蒸馏水或去离子水。 洗瓶或洗板机。
样品制备
取动物全血，按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血。
洗涤液的准备
浓缩洗涤液使用前应恢复至室温，如有盐结晶，摇动使结晶的盐溶解，然后用蒸馏水或去离子水作10倍稀释。稀释好的洗涤液可在4℃存放一周左右。
样品的稀释
在血清稀释板中按1：51的体积比稀释待检血清（例如：200μl样品稀释液中加4μl待检血清）。
注意：阴性和阳性对照不用稀释。取每个样品后都要更换吸头，准确记录每个样品在板上的位置。每个样品在加入到包被板微孔前应充分混匀。
猪蓝耳病抗体试剂盒注意事项
试剂盒使用前各试剂应平衡至室温，使用前应摇匀，使用后放回2～8℃。 不同品种、不同批号试剂盒的试剂组分不得混用，使用试剂时应防止试剂污染。 底物和终止液对皮肤和眼可能有刺激性，使用时应该注意防护。 TMB（底物B液）不要暴露于强光和避免接触氧化剂。 检测板拆封后应避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥剂放于自封袋中，并尽快置于2～8℃)。 所有废弃物在丢弃之前应合理处理以免污染。 严格遵守操作说明可以获得*的结果。操作过程中移液、定时和洗涤等的全部过程必须精确。 血清稀释板为一次性用品，不得重复使用；血清稀释板的*容量为300μl/孔。
猪蓝耳病抗体试剂盒操作步骤
取预包被的检测板（根据样品*，可拆开分次使用），将稀释好的待检血清取100μl加入到检测板孔中。同时设阴性、阳性及空白对照各1孔，取阴性及阳性对照各100μl
分别加入反应孔中，空白对照仅加入100μl样本稀释液。轻轻振匀孔中样品（勿溢出）。
盖上封板膜，置37℃温育30分钟。 小心揭开封板膜，甩掉板孔中的溶液，用洗涤液洗3次。每次用洗涤液注满板孔（约350μl），静置1分钟后甩掉。洗涤3次后在干净吸水纸上拍干。 每孔加酶结合物100μl，盖上封板膜，置37℃温育30分钟。 小心揭开封板膜，甩掉板孔中的溶液，洗涤3次, 方法同2。切记*在干净吸水纸上拍干。 每孔先加底物A液50μl、再加底物B液50μl，混匀、盖上封板膜37℃闭光显色10分钟。 每孔加终止液50μl，使反应终止，10分钟内测定结果。
结果判定
以空白对照调零用酶标仪于450nm（630nm作参比波长）读取吸光度A值。试验成立的条件是阳性对照孔A450值大于或等于0.5，阴性对照孔A450值必须小于0.15。如果试验无效，试验中的操作值得怀疑，试验应重做，并仔细检察各组分。
样品A450值大于0.15+阴性对照孔均值，判为阳性；样品A450值小于0.15+阴性对照孔均值，判为阴性；如阴性对照孔均值小于0.05按0.05计算。
贮存方法： 2 - 8oC下贮存。
有效期： 12个月。
猪蓝耳病又称“猪繁殖与呼吸障碍综合征”，是由猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒引起，以成年猪生殖障碍、早产、流产和死胎，以及仔猪呼吸异常为特征的传染病，是一种免疫抑制病，常常继发其他病原感染。
世界上许多国家和地区都发生过猪蓝耳病。该病于上世纪90年代中期传入中国，世界动物卫生组织（OIE）将其列为法定报告动物疫病，中国列为一类动物疫病。
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