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产品名称
HUVEC 人脐静脉血管内皮细胞（通过STR)
（ Cat.No： XK-Y1285）
适用范围
本产品*于科学研究， 绝不可
作为人类或者动物疾病的治疗产品使
用。
*培养基配置
ECM 内皮细胞*培养基
细胞图片

产品描述
 

拆包
1. 请立即检查包装袋是否有破损或漏液， 如有， 请拍照并及时与技
术联系。
2.请立即将细胞从包装盒中取出， 并按照下方操作步骤进行处理。
T25 培养瓶中的细胞操作步骤
1. 75%酒精棉球擦拭 T25 细胞培养瓶外部。
2. 显微镜观察细胞生长情况， 并对细胞进行不同倍数拍照保存（ 40
× ,100× ,200× 各一张） 前三天照片为重要售后依据， 不提供或未
拍照默认收到状态良好。
3. 不要打开培养瓶盖， 将细胞放入 37 度培养箱中静置 3-4 小时后
再做处理， 以稳定细胞状态
4. 贴壁细胞： 若细胞密度较小， 无菌操作， 去掉培养基。 每瓶添加
配制好的*培养基 5-6ml。 放到 37 度培养箱培养。 待细胞密度到
80%以上， 进行传代。
悬浮细胞： 将瓶内所有培养基离心收集， 重悬计数根据密度进行
分瓶， 密度在 3x10^5/ml 为宜。
注意： *次传代比例建议 1:2， 之后可根据细胞密度和增
殖情况适当调整。
冻存管细胞的操作步骤
1. 收到细胞后， 检查外包装情况和箱内是否还有干冰。 如有外包装
破损干冰已*挥发等问题， 请即时联系。
2. 将细胞取出转移至-80 度冰箱(不超过一周） 或液氮保存,建议尽早
复苏。
3. 复苏*管后有活性状态问题及时与我们联系， 会有技术人员与
您沟通指导后再复苏第二管。
注意： 为保证细胞的高存活率， 收到产品后， 请立即解冻
复苏细胞。

细胞传代
1. 细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时， 弃 25cm2 培养瓶中的培养
液， 用 PBS 清洗细胞一次；
2. 添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中， 倒置显微镜下观
察， 待细胞回缩变圆后加入 5ml *培养液终止消化， 再轻轻吹打
细胞使之脱落， 然后将悬液转移至 15ml 离心管中， 1000rpm 离心
5min；
3. 弃上清， 沉淀细胞用 1-2ml *培养基重悬， 然后按 1:2 比例进
行分瓶传代， 最后放入 37℃ ， 5%CO2 细胞培养箱中培养。
细胞复苏
1. 从液氮中取出细胞冻存管（ 注意： 佩戴防爆管面具） ， 快速将其
置入 37℃ 水浴中解冻， 直至冻存管中无结晶， 然后用 75%的酒精擦
拭冻存管外壁；
2. 将冻存管中的细胞移至含 6ml *培养基的 15ml 离心管中，
1000rpm 离心 5min；
3. 弃上清， 沉淀用 6ml *培养基重悬， 接种 25cm2培养瓶， 于 37℃ ，
5%CO2 细胞培养箱中培养。
细胞冻存
1. 细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时， 弃 25cm2 培养瓶中的培养
液， 用 PBS 清洗细胞一次；
2. 添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中， 倒置显微镜下观
察， 待细胞回缩变圆后加入*培养液终止消化， 轻轻吹打细胞使
之脱落， 然后将悬液转移至 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3. 用适量的冻存液（ FBS： DMSO=9 ： 1） 重悬细胞， 并放置于冻
存管中；
4. 先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h， 然后将其移入-80℃ 过夜， 24h
后转入液氮中进行长期保存。 使用程序降温盒可直接放入-80℃ 。