小动物活体成像系统
小动物活体成像系统—参数和配置
—MIIS产品线
Molecular Devices MIIS()是一套微光学系统，这套系统能够帮助您完成那些需要从小动物或植物中检测微弱荧光和发光信号的研究应用。
Molecular Devices MetaMorph-MIIS是一个图像获取和分析软件。尤其特殊的是此软件可以控制Z轴定位，滤光片转轮和光源，并且还能获取时间序列和进行高速成像。
可选择高灵敏的EMCCD照相机，深度制冷CCD和强大的sCMOS照相机作为检测器。使用高亮度LED来检测荧光信号。LED光源避免了紫外波段常见的光毒性，并提供了*的稳定性。
小动物体内成像系统特点
可选择对您实验*化的照相机
荧光光源和发光检测
使高速图像获取成为可能
高度可扩展性
—软件介绍
软件MetaMorph-MIIS / MVDOC-MIIS共有参数
照相机控制：
● 曝光时间设置: 手动, 自动多重选择
● 特定捕获区域: 全视野，1/4视野及客户自定义范围
● 像素融合: ×1·×2·× 4·×8 (取决于所选照相机)
● 保存和读取每个拍摄设置
● EM增益: 1-1000倍 (EMCCD型)
动态分析功能
● 亮度和面积变化量的图表，平铺显示，影片制作，还有多图像同步操作叠加功能
● 明场图像和荧光/发光信号叠加，亮度测量，文字，时间标记箭头等MIIS工具栏
● 可选择项目来定制工具栏
● 工具栏上*必须的功能是实验步骤功能，分析步骤是录制的且是可执行的
● 时间序列成像
● 高速成像
● 自发荧光消减和均匀处理功能
● 线扫描功能
● 自动对焦功能
MetaMorph-MIIS 专有功能
● 隔热板温度记录（可做图）
● 多孔板分析（grid分析）
应用实例（一）
● 注射细胞: HEK293 (活细胞, 弱荧光素酶表达)
● 表达荧光素酶: ELuc (祖母绿Luc), FLuc (萤火虫Luc)
● 缓冲液: HBSS (LifeTechnologies)
● 发光底物: 1 mg D-Luciferin (Wako, D-Luciferin 钾盐) / 1 mg Akalumine (Wako)
※小鼠皮下注射细胞, 缓冲液,发光底物混合物
● 小鼠: BALB / cSlc-nu / nu (雌性, 5周)
● 图像描述: zui左明场图像, 左数第二张为发光图像. 右数第二张是明场和发光图像叠加 。注意红圈区域; 左侧两块区域为-ELuc 表达细胞 (左上 -Akalumine,左下 -D-Luciferin),右侧两块区域为 –Fluc 表达细胞 (右上 -Akalumine, 右下-D-Luciferin)
● 照相机设置: 曝光时间(明场5毫秒, 发光60秒, 无EM增益)
● 图片描述: 左为肝部ELuc 图像,观察发光 Akarumine 1mg, 右为肝部D-Lucirerin图像, 观察发光 D-luciferin 10mg
● 照相机设置: 曝光时间60秒, EM 增益 × 1000
应用实例（二）
● 加入细胞: HEK293 (活细胞, 弱荧光素酶表达)
● 表达荧光素酶: ELuc (祖母绿 Luc), Fluc (萤火虫 Luc)
● 缓冲液: HBSS (LifeTechnologies)
● 发光底物: 1 mg of D-Luciferin (Wako, D-Luciferin 钾盐)
● 检测原理：ADRB2 and β-Arrestin2 融合荧光素酶 (ELuc) 片段拆分加入到每种药物中(配体)，在荧光素酶互相
接近时即可发射信号
● 加入药物: 异丙肾上腺素(配体), 普萘洛尔(抑制配体功能)
● 照相机设置: 曝光时间10秒, EM 增益 × 800
应用实例（三）
● 当使用EM 增益时，能够使用1/3的曝光时间进行点检测 (对于希望缩短曝光时间的应用，可使用有效EM ex模式) 。
左: 3分钟曝光 (EM增益1000倍), 右: 10 分钟曝光(EM增益关)
● 注射细胞: HEK293 (活细胞,荧光素酶稳定表达)
● 表达荧光素酶: NanoLuc (Promega)
● 缓冲液: HBSS (LifeTechnologies)
● 发光底物: 10 μL Furimazine (Promega)
● 将混合发光底物的培养基注射到小鼠皮下
● 小鼠: BALB / cSlc-nu / nu (雌性, 5 周) ，每秒钟6对 * 1 (明场和化学发光都是60 毫秒曝光) 通过使用NanoLuc对
活动小鼠进行的实时拍摄
● 照相机设置: 曝光时间60毫秒, EM增益 × 700
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