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新型高通量双光子荧光寿命显微镜问世！
2026年08月10日 11:00:01
来源：化工仪器网 点击量：4282
中国科学院深圳先进技术研究院生物医学与健康工程研究所、医学成像科学与技术系统全国重点实验室郑炜、叶世蔚团队成功研制出一种新型高通量的双光子荧光寿命显微镜(LD-2P-FLIM)。
8月7日，中国科学院深圳先进技术研究院生物医学与健康工程研究所、医学成像科学与技术系统全国重点实验室郑炜、叶世蔚团队在《美国国家科学院院刊》上发表最新研究。
研究团队成功研制出一种新型高通量的双光子荧光寿命显微镜(LD-2P-FLIM)，该显微镜就像捕捉大脑复杂动态的“高清摄像机”，能够对活体小鼠大脑进行高分辨率、大视野、多脑区、多参量、定量化功能成像。该技术为理解大脑运行机制、无创脑机接口提供了新的信息采集范式。
双光子显微镜具有穿透能力强、天然光学层析能力等特点，是脑科学研究中的“利器”。然而，传统的双光子显微镜存在视野受限(通常<0.5 mm²)、成像区域大小与时间分辨率存在固有权衡、仅依赖荧光强度导致信息维度单一等瓶颈。
围绕这些挑战，研究团队开发了一种有效的自适应光学校准方法，在仅使用商用光学器件的条件下实现了视野直径可达3毫米且能维持全视野分辨率优于0.7微米的大视野高分辨率双光子成像。
此外，研究团队破解了成像区域与成像速度之间的矛盾，基于“时分复用”原理，开发了多区域同步成像系统，可在3毫米的全视野范围内任意、灵活选择两个子区域进行同步监测。
实验证明，研究团队研发的FPGA模块可将荧光寿命成像数据通量提升超过200倍，达到每秒1573万像素，这意味着原来拍一张“照片”的时间，现在能拍一部“电影”，让利用FLIM实时观察活体大脑的动态变化成为可能。
基于开发的新型高通量双光子荧光寿命显微镜，研究团队发现其在大脑功能成像方面的多种应用场景与潜力。
研究结果显示，该显微镜能成功看清神经元之间的“对话”行为。不仅能在3毫米的完整视野中清晰识别神经元树突棘结构，还能同步探测超3000个神经元的钙离子活动，并推测出相应的神经电位信号。
另外，该技术还能同时监测小鼠在疼痛刺激下的运动和感觉皮层的神经活动，有助于理解不同脑区之间的协同工作机制。
未来，该技术有望在两个层面展开深入研究：在成像技术方面，可结合低重频高脉冲能量的激光器以实现更多脑区的同步成像，并开发无需复杂计算即可实时获取荧光寿命的新方法。在大脑功能成像方面，可结合更多新型荧光寿命探针，为神经递质、神经调质等神经化学物质的在体定量成像提供工具。
素材来源：科技日报
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