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纳米磁珠法提取和纯化人唾液中皮质醇及测定 液相色谱质谱联用法团体标准发布
2026年05月22日 13:53:40
来源：化工仪器网 点击量：5142
磁珠法在样本前处理方面具有高特异性和灵敏度，能够有效减少基质干扰，同时具备良好的重复性。
皮质醇(Cortisol)，也称为氢化可的松，是一种由肾上腺皮质分泌的糖皮质激素。唾液皮质醇测 试在临床和研究中都具有重要意义。它不仅能够应用于诊断库欣综合征，还能用于评估肾上腺皮质功能 减退、抑郁症和监测应激反应等相关疾病。由于唾液无创、便捷和适用于多次取样的特点，唾液皮质醇 测试在许多情况下都是一种理想的选择。唾液中皮醇含量极低(ng/mL级)，因此对检测设备和技术要求很高。
目前，主要的皮质醇分析方法有放射免疫法、酶联免疫法、气相色谱质谱法和液相色谱质谱法(LC-MS/MS)。其中，LC-MS/MS 因其更高的准确性和特异性、更广的线性范围、更高的敏感性和抗干扰能力，被国内外专家共识和指南推荐为最佳检测方法。然而，LC-MS/MS检测通常涉及复杂的前处理过程，如蛋白质沉淀、固相萃取、液液萃取、超滤、浓缩等，这在一定程度上限制了其应用。
磁珠法在样本前处理方面具有高特异性和灵敏度，能够有效减少基质干扰，同时具备良好的重复性。相比传统的前处理方法，磁珠法步骤更少，操作简便，降低了对操作人员技能的要求。本文件规范了通过纳米磁珠提取纯化唾液中皮质醇，及利用LC-MS/MS检测的方法，有利于推广唾液皮质醇检测方法。
纳米磁珠表面经皮质醇单克隆抗体修饰后，与唾液样本中的皮质醇发生特异性免疫亲和结合，形成“目标物-纳米磁珠”免疫复合物。在外加磁场作用下，可实现复合物的快速富集与定向分离。随后加入 洗脱液进行解离洗涤，将特异性结合的皮质醇从磁珠上洗脱下来，完成皮质醇的高效提取与纯化。检测 阶段，采用液相色谱对复杂基质组分进行有效分离，各色谱流出组分依次进入质谱检测器。通过解析质 谱特征峰的保留时间、质荷比及峰面积，并进行数据拟合，实现唾液中皮质醇的精准定性识别与高灵敏度定量分析。
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