【摘要】:目的:利用稀土离子作为示踪剂,建立DON/ZEN双标记间接竞争时间分辨荧光免疫分析方法同时检测DON、ZEN。方法:以DON-BSA、ZEN-BSA共包被于固相微孔板,与DON/ZEN标准或样品中的DON、ZEN竞争结合抗DON多抗、抗ZEN单抗,然后分别用稀土离子Eu3+-羊抗兔IgG及Sm3+-羊抗鼠IgG进行示踪检测,并对建立DON/ZEN-双标记TRFIA进行方法学的考核。结果:DON/ZEN-双标记TRFIA检测灵敏度,DON为0.2ng/ml、ZEN为0.7ng/ml,检测范围为:DON0.2~100ng/ml,ZEN0.7~50ng/ml,批内、批间变异率均小于10%。不同样品添加回收实验表明玉米、小麦样品中DON平均回收率分别为102.8%、98.8%,ZEN平均回收率分别为94.2%、95.7%。DON/ZEN-双标TRFIA检测时,DON与ZEN不相互干扰,该方法特异性好。玉米样品检测结果表明,DON/ZEN双标记TRFIA与单标记DON-TRFIA、ZEN-TRFIA试剂盒结果高度相关,具有较好的一致性,两者检测DON的结果相关系数为0.9760,检测ZEN结果的相关系数为0.9695,结论:DON/ZEN-双标记TRFIA灵敏度高,检测范围宽,重复性、稳定性好,一次检测可同时得到DON、ZEN两个结果,是一种简便、快速、经济、稳定、可进行大批量样品筛查的检测方法。
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【关键词】: 玉米赤霉烯酮 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 时间分辨免疫分析 生物毒素 双标记 同时检测 检测灵敏度 微孔板 稀土离子 方法学
【正文快照】:
由于真菌的寄生和真菌毒素的产生,严重影响农作物的产量,降低农产品和饲料品质,造成巨大经济损失,全世界每年由于霉变污染真菌毒素引起的农产品和工业原料的损失达数百亿美元。其中,玉米赤霉烯酮和脱氧雪腐镰刀菌烯醇是较为常见、影响较大的两种真菌毒素。玉米赤霉烯酮(zearal