【摘要】:目的:利用口蹄疫病毒非结构蛋白3B单克隆抗体建立液相阻断ELISA检测方法,进行定量检测口蹄疫病毒培养液中的非结构蛋白含量。方法:首先将工作浓度的3B单抗与待测病毒培养液过夜结合反应,然后取结合液转移至用3B蛋白包被好的酶标板上,用标准3B蛋白做12个梯度做对照,同时设阴性对照和空白对照。通过回归分析算出口蹄疫病毒培养液中的非结构蛋白3B含量。结果:回归曲线呈典型的S形,符合4参数logit曲线拟合,相关系数R=0.99,检测范围为5~1500ng/ml,半数抑制浓度(Ic50)为130ng/ml。结论:该方法能特异、敏感的检测到病毒培养液中的非结构蛋白3B成分,并进行定量。
【关键词】: 口蹄疫病毒 单克隆抗体 非结构蛋白 定量ELISA 培养液 定量检测 阴性对照 酶标板 半数抑制浓度 检测方法
【正文快照】:
口蹄疫(foot-and-mouth disease,FMD)被世界动物卫生组织(OIE)和联合国粮农组织(FAO)列为A类动物传染病之首[1]。大多数亚洲、非洲、南美洲国家一直都通过注射灭活疫苗的办法来控制该病的流行,大多数发展中国家和部分发达国家,如欧盟各国允许在暴发FMD时进行疫苗的紧急接种[2