【摘要】：应用Thermal Shift Assays技术,高通量优化了重组森林脑炎病毒丝氨酸蛋白酶纯化过程中所使用的缓冲液中盐的种类和pH,显著改善了该重组蛋白在纯化过程中出现可溶性聚集体的现象。最终获得的重组蛋白质单体量由原先的75%提高到99%以上,极大提高了该纯化蛋白质的均一性和质量,为后续的蛋白质结晶研究奠定了基础。

【关键词】： Thermal Shift Assays 重组森林脑炎病毒丝氨酸蛋白酶 纯化过程 蛋白质药物 重组蛋白质 缓冲液体系 凝胶过滤层析 纯化蛋白 亲和层析 溶解曲线

【正文快照】：
在蛋白质研究,如蛋白质药物、蛋白质结构的研究中都无法回避蛋白质生产工艺中面临的各种挑战。作为生物活性大分子的蛋白质对所处环境条件非常敏感,容易发生降解、聚集等不利状况。高产量高质量的稳定蛋白质产品是蛋白质研究的一贯需求。在蛋白质的聚集行为中,聚合率以及最终