全自动电位滴定法测定疫苗佐剂羟值

一、前言

佐剂是疫苗的一种添加剂，当它先于抗原或与抗原混合注入机体后，能够增强机体对抗原的免疫应答或者改变免疫反应的类型，属于非特异性的免疫增强剂。随着现代生物技术和基因工程技术的迅速发展，针对不同疾病已开展了各种新型基因工程疫苗的研制，佐剂尤其是新型免疫佐剂的研究就显得尤为迫切。

在标准 T/CVDA02《复合矿物油动物疫苗佐剂》中，对于佐剂的质量检测中有明确规定测定羟值含量，本方法参考其中的检测方法制定了运用电位滴定检测的方法。该方法检测方便，减少了人为判断指示剂颜色对结果的误差影响，增加了检测精确度，并且提高了检测效率，解放操作员的双手。

二、仪器与试剂

2.1、仪器

JH-T6 全自动电位滴定仪，PH 复合电极，水浴锅，分析天平等。

2.2、试剂

酰化试剂（取对甲苯磺酸 14.4g,  置干燥的 500ml  具塞锥形瓶中，加醋酸乙酯 360ml，振摇使溶解，缓缓加入醋酐 120ml  摇匀，密塞，放置 3  日后备用），吡啶-水（3：5），氢氧化钾标准滴定液（1mol/L）。

三、实验方法

3.1、样品检测

准确称取 2g 左右样品，置于滴定杯中，加入 5mL 酰化试剂，封口膜密封，轻轻摇动至溶解。置于 50℃水浴加热 25min ，放冷，加吡啶-水（3：5）20mL ，5 分钟后用氢氧化钾标准滴定液（1mol/L），以 PH 复合电极为工作电极，在JH-T6上进行滴定至终点。同时做空白实验。

设定滴定仪参数如表 1 所示：

表 1 滴定参数设置

3.2、图谱测试示例

四、结果与讨论

4.1、实验结果

实验结果如表 2 所示：

表 2 测试结果

4.2、结论

本次测定的动物疫苗佐剂的羟值均小于参考标准要求中的 25（mg/g），测试结果重复性良好，满足检测要求。

参考文献

[1] T/CVDA02 复合矿物油动物疫苗佐剂[ S ].