植物细胞氧化应激活性氧羟自由基原位荧光染色试剂盒产品说明书（中文版）

主要用途

 植物细胞氧化应激活性氧羟自由基原位荧光染色试剂是一种旨在通过透膜荧光染色剂羟苯基荧光素，与细胞内羟自由基的反应，产生绿色荧光，来测定细胞内羟自由基活性氧族的生成和增加的而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。可以被用于细胞凋亡、信号传递、衰老、代谢等的研究。其适用于各种新鲜植物组织（例如根尖、叶片等）和培养细胞等细胞内氧化应激活性氧羟自由基的分析。产品严格无菌，即到即用，操作简易，活体检测，性能稳定，荧光清晰。

技术背景

超氧自由基阴离子（superoxide radical；O2^-）、过氧化氢（hydrogen peroxide；H2O2）、羟自由基或氢氧基（hydroxyl radical；OH^-）、过氧化基（peroxyl radical；ROO^-）、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxyl radical）、氮氧基（nitric Oxide；NO^-）、过氧亚硝基阴离子（peroxynitrite anion；ONOO^-）次氯酸（hypochlorous acid；HOCl）、半醌自由基（semiquinone radical）、单线态氧气（singlet oxygen）等细胞内活性氧族（Reactive Oxygen Species；ROS）的产生和增多，将导致细胞衰老或凋亡。其中羟自由基或氢氧基具有极度反应性和毒性，同时半衰期短（10^－9至10^－10秒）。其产生主要是水分子受到高能量放射后裂解、过氧化物和次氯酸反应、过氧化氢的还原、超氧化物的歧化等形成。在植物组织中，羟自由基将启动放射性诱导损伤、攻击植物蛋白和膜脂而引起氧化损伤。羟苯基荧光素（Hydroxyphenyl fluorescein；2-[6-(4’-Hydroxy)phenoxy-3H-xanthen-3-on-9-yl]benzoic acid；HPF）是一种*自由通过细胞膜的染色剂，一旦与羟自由基反应，产生脱苄基（o-dearylation）作用，生成强烈荧光的荧光素（fluorescein）。据此证明植物细胞内羟自由基活性氧族的存在。

产品内容

 清理液（Reagent A） 100毫升

 固着液（Reagent B）  50毫升

 离析液（Reagent C）  20毫升

 染色液（Reagent D） 100微升

产品说明书   1份

保存方式

保存 染色液（Reagent D）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里； 固着液（Reagent B）和 离析液（Reagent C）具有腐蚀性，注意操作安全；有效保证6月

用户自备

胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液（GMS12024）：用于细胞脱离

*细胞培养液（GMS12052）：用于细胞操作所需的培养基

15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器

1.5毫升离心管：用于染色液配制的容器