小鼠II型胶原

本试剂盒仅供研究使用      标本：血清或者血浆

一、 试 剂 组 成
精密度微孔板96孔 （Microtitration Strips） 1块 2～8℃干燥保存
酶标偶合液 （Conjugate ）    1瓶 12.0毫升 2～8℃冷藏保存
标准品 （Standard） 5瓶 各1.0毫升 2～8℃冷藏保存
呈色剂A （Substrate A）  1瓶 6.0毫升 2～8℃避光冷藏保存
呈色剂B （Substrate B）  1瓶 6.0毫升 2～8℃避光冷藏保存
终止液 （Stopping Solution） 1瓶 6.0毫升 室温保存
20倍浓缩洗涤液 （Rinsing Buffer x 20） 1瓶 60.0毫升 2～8℃冷藏保存
5倍浓缩样品稀释液 （Diluent x 5） 1瓶 15.0ml 2～8℃冷藏保存
英文说明书，中文说明书  各一份 室温保存

二、注意事项
1.  此试剂为体外检测试剂，效期内使用，试剂应视为传染物，不同总批号的试剂不能混用。
2． 使用前应将盒内各试剂取出。室温放置至少30分钟，
3． 浓缩洗涤液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟。
4． 浓缩样品稀释液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟
5． 若24小时内进行实验，标本可存放于2～8℃。不需及时实验，标本-20℃保存，避免反复冻融。
6． 在反复清洗微孔板，并扣干微孔中的残余液体，否则将降低度，造成吸光度偏离的假像。
7． 加样完毕后，应注意轻微摇动微孔反应条，以便使孔中的液体充分混匀。
8． 试剂盒保存于2～8℃，请勿冷冻，有效期请见盒内标示。

小鼠II型胶原

三、实验前准备
1．使用前应将盒内各试剂取出，室温放置至少30分钟。
2．准备各种实验仪器及材料，如微量移液器，吸头，医用蒸馏水等
3．浓缩洗液与医用蒸馏水1︰19倍稀释后成为应用洗涤液
4．浓缩样品稀释液与医用蒸馏水1︰4倍稀释成应用样品稀释液
5．用应用样品稀释液来稀释样品，按照1：100的体积比来稀释样品如10μl的样品加入到1ml的应用样品稀释液中，充分混匀待用。）

四、操 作 步 骤
1．取出酶标板，设空白孔，依照次序对应分别加入100μl的标准品于空白微孔中（空白孔视为0号标准品，用医用蒸馏水替代）
2、分别标记样品编号，加入100μl的稀释样品于空白微孔中（不同的样本采用不同的吸头）。
3、将酶标板置于37℃温育30分钟；
4、将酶标板板取出，将其中的液体甩去，每个孔中全部加满应用洗涤液后，立即甩去液体;
5、每个孔中加满应用洗涤液后，轻微振摇酶标板30秒后将孔中的应用洗涤液甩去，在吸水纸上将酶标板拍干。
6、重复第5个步骤5次，在吸水纸上将酶标板拍干。
7、在标准品孔和样品孔中加入100μl的酶标偶合溶液。
8、将96孔板置于37℃温育30分钟。
9、将酶标板取出，将其中的液体甩去，每个孔中全部加满应用洗涤液后，立即甩去液体。
10、每个孔中再次加满洗涤应用液后，室温轻微振摇酶标板30秒后将孔中的应用洗涤液甩去，在吸水纸上将酶标板拍干。
11、重复第5个步骤5次，在吸水纸上将酶标板拍干。
12、在每个孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl。轻轻振荡混匀。（A液、B液采用不同的吸头加样）
13、将酶标板置于37℃避光温育反应15分钟。
14、每个微孔中加入50μl的终止液，轻轻振荡混匀。
15、在酶标仪上，450nm处测定OD; 显色后，15分钟内进行测定。
16、根据制备的标准曲线，计算样本含量

小鼠II型胶原

五、结 果 判 断
1. 仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值；
2、检测值范围：0－800nmol/L
3、敏感度：1.0nmol/L

Iron （II） chloride , tetrahydrate 氯化亚铁四水 [13478-10-9] 250g
Iron （III） chloride, anhydrous 无水三氯化铁 [7705-08-0] 500g
Iron （III） chloride, hexahydrate 氯化高铁六水 [10025-77-1] 250g
Iron（III） citrate 柠檬酸铁 [3522-50-7] 250g
Iron （III） nitrate, nonahydrate 硝酸铁九水 [7782-61-8] 250g
Iron （II） oxalate, dihydrate 草酸亚铁二水 [6047-25-2] 250g
Iron （III） oxide 氧化铁（III） [1309-37-1] 250g
Iron （III ） phosphate dihydrate 正磷酸铁 [10045-86-0] 500g
Iron （III ） pyrophosphate 焦磷酸铁 [10058-44-3] 500g
Iron（III） sulfate, hydrate 水合硫酸铁 [15244-10-7] 250g
Iron（III） sulfate, hydrate 水合硫酸铁 [15244-10-7] 250g
Iron（III） sulfate, hydrate 水合硫酸铁 [15244-10-7] 100g
Iron（III） sulfate, hydrate 水合硫酸铁 [15244-10-7] 500g
 

小鼠II型胶原

Iron（II） sulfate, heptahydrate 硫酸亚铁七水 [7782-63-0] 500g
Iron（II） sulfate, heptahydrate 硫酸亚铁七水 [7782-63-0] 2.5kg
Iron（II） sulfate, heptahydrate 硫酸亚铁七水 [7782-63-0] 500g
Iron（II） sulfate, heptahydrate 硫酸亚铁七水 [7782-63-0] 100g
Iron（II） sulfate, heptahydrate 硫酸亚铁七水 [7782-63-0] 500g
Iron（II） sulfate, heptahydrate 硫酸亚铁七水 [7782-63-0] 2.5kg
Iron （II） sulfide 硫化铁 （II） [1317-37-9] 500g
Iron （III） tartrate 酒石酸铁 [2944-68-5] 500g
Isethionic acid ammonium salt 磺酸铵盐 [57267-78-4] 50g
Isethionic acid sodium salt 磺酸钠盐 [1562-00-1] 50g
Isoamyl bromide 1-溴代异戊烷 [107-82-4] 250ml
Isobutanol 异丁醇 [78-83-1] 500ml
Isobutyl bromide 溴代异丁烷 [78-77-3] 250ml