产品推荐:气相|液相|光谱|质谱|电化学|元素分析|水分测定仪|样品前处理|试验机|培养箱


化工仪器网>技术中心>解决方案>正文

欢迎联系我

有什么可以帮您? 在线咨询

【干货】生物电镜样品取材方法

来源:北京冠普佳科技有限公司   2014年11月02日 16:12  

为大家继续介绍生物电镜样品取材方法,以上所有电镜方案均由北京冠普佳科技有限公司提供。

请勿复制,如有复制将追究法律责任。

生物电镜样品取材方法如下:

高尔基体(Golgi apparatusGolgi complex)亦称高尔基复合体、高尔基器。是真核细胞中内膜系统的组成之一。为意大利细胞学家高尔基Golgi1898年用银染方法在神经细胞中发现。电镜下,高尔基复合体由三种基本成分组成即扁平囊泡、小泡和大泡,多位于细胞核与毛细胆管间的区域内。

 

电镜样品取材的基本要求

取材的动作要迅速,在材料离体后1min内就进入固定液,不要超过10 min;解剖器械要锋利(可使用新的双面刀片),避免牵拉和挤压,尽量减少取材中的机械损伤。

取材要准确。①器官要准确;②部位要准确:如胃肠道、皮肤和角膜、视网膜、耳蜗等一定要注意方向性,确保要观察的部位在切面方向。组织块的包埋方向与切面方向要十分清楚,尽量自己在包埋前进行定位。

取材过程应尽量在低温下进行(0~4℃),以降低酶的活性,减少细胞内结构的损伤。

所取材料体积要小,一般不超过1mm3,可以取成条状,但截面约1mmX 1mm。因为固定剂的渗透力较弱,若组织块太大,块的内部将得不到良好的固定。

 

1 动物及人体组织的取材

动物组织的取材,应在麻醉(1%戊*钠按5ml/kg体重腹腔注射)或断头急性处死,解剖出所需器官,用解剖剪刀剪取一小块组织,放在干净的纸板上,滴一滴冷却的固定液,用新的、无油污锋利的(双面)刀片将材料切成大约1mm宽,23mm长的小块,再将其切成1mm3的小块,取材要尽量快速准确。如果有方向要求,如一些空腔器官、皮肤、角膜等,要注意方向性,保证需要观察的部位准确取到。zui后用牙签将这些小块逐一放入盛有冷的新鲜固定液的有盖青霉素小瓶里,放入冰箱冷藏室低温固定(4℃)。尽快送中心实验室进行处理。

2 培养细胞的取材

生长在培养瓶和培养板中的培养细胞取材时,悬浮细胞可直接离心,贴壁细胞应先倒出培养液,采用胰蛋白酶消化或用细胞刮刮下。而后带培养液进行离心(10001500 rpm10 min左右。离心完毕倒出培养液,管底的细胞团不要打散,沿管壁缓慢倒入适量的(一般为材料体积的510倍)2.53%戊二醛固定液,固定约1h,也可在4℃冰箱固定。尽快送中心实验室进行后固定,也可自己用1%锇酸固定后送样。

3 植物组织的取材

植物组织的取材比较容易,植物细胞离体后变化不像动物细胞那样迅速,但植物细胞的细胞壁阻碍着固定液的迅速渗透。因此,植物材料的取材宜切成薄片状,经适当固定后再切成小方块。

取材后还要经过组织处理,聚合包埋,修块,切片,染色等,然后就可以上透射电子显微镜观察,在这一方面Leica提供如下全套样品制备解决方案

 

 

徕卡纳米技术部

Leica Nano Technology

透射电镜/扫描电镜/生命科学/工业材料样品提供样品制备全套解决方案。

徕卡纳米技术部提供

超薄切片、组织处理、高压冷冻、镀膜、临界点干燥、机械研磨抛光、离子束研磨、冷冻断裂/复型及真空环境传输等各类技术手段,适用于TEM/SEM/FIB/LM/AFM样品制备。

免责声明

  • 凡本网注明“来源:化工仪器网”的所有作品,均为浙江兴旺宝明通网络有限公司-化工仪器网合法拥有版权或有权使用的作品,未经本网授权不得转载、摘编或利用其它方式使用上述作品。已经本网授权使用作品的,应在授权范围内使用,并注明“来源:化工仪器网”。违反上述声明者,本网将追究其相关法律责任。
  • 本网转载并注明自其他来源(非化工仪器网)的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品第一来源,并自负版权等法律责任。
  • 如涉及作品内容、版权等问题,请在作品发表之日起一周内与本网联系,否则视为放弃相关权利。
企业未开通此功能
详询客服 : 0571-87858618