解脲脲原体(UU)是耐酸不耐碱的,UU培养的原理是在于其菌体中含有脲酶,而UU培养基中含有尿素,UU的生长需要其本身的脲酶分解尿素益提供其自身生长所需要的营养物质,UU培养基中含有指示剂酚红,由于尿素被分解释放出氨从而使培养基变碱而使培养基由黄变红,但是这种红是一种清亮的红色,透明澄清无浑浊,UU其适宜的PH值为6.2-6.5,由于尿素分解产氨是PH上升,UU在PH值大于7的条件下会迅速死亡,因此,在培养时要随时观察其液体培养基的PH值,一旦看到培养基变红,要立即取出,以防培养基PH上升导致UU死亡,一般UU需要在培养至对数生长期时是活力zui强的时候(培养基呈橙红色变化)。一般UU生长需要24小时。
另外,UU生长所需要的培养基的成分一般每隔单位有所不同,但是有一点肯定,就是需要小牛血清。
解脲脲原体培养基配制:(在自制培养基基础上加:)PH:6。13
小牛血清:30ml/250ml
10%尿素:12 ml/250ml
0.2%酚红:4。5 ml/250ml
青霉素G:50万U/250ml
酵母:6。25 g/250ml
磷酸二氢钾:0。375 g/250ml
天门冬素:0。025 g/250ml
自制培养基包括:新鲜牛肉浸液:90毫升
蛋白胨:1克
氯化钠:0。5克
磷酸二氢钾:0。15克
(此自制培养基可以高压灭菌)。
加琼脂配成固体,一般1%即可!
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