背景
叶黄素、玉米黄质、α-胡萝卜素、β-胡萝卜素和番茄红素是天然植物性食品中Z为常见的5种类胡萝卜素类营养物质,具有维生素A原活性、抗氧化、参与细胞传递、免疫功能调节与促进、保护皮肤免于紫外线伤害和抑制黄褐斑生成等诸多生理保健功效。
但这5种类胡萝卜素类营养物质的液相色谱同时分离测定一直比较困难,原因是这5种类胡萝卜素类营养物质之间的极性差异比较大,叶黄素和玉米黄质分子结构中有两个羟基,极性较强,在反相液相色谱柱(如C18等)上的保留力较弱,而α-胡萝卜素、β-胡萝卜素和番茄红素是烃类物质,仅由碳和氢两种原子构成,无任何极性官能基团,极性极弱,在反相液相色谱柱(如C18等)上的保留力*;另外,更为重要是叶黄素和玉米黄质之间,以及α-胡萝卜素和β-胡萝卜素之间,两两互为同分异构体,相互间仅是一个碳-碳双键的位置差异,液相分离难度大(分子结构详见附录A,特征吸收光谱图详见附录B)。
本应用案例采用月旭科技公司生产的C30反相高效液相色谱柱、两元梯度洗脱,实现了单次高效液相色谱检测对叶黄素、玉米黄质、α-胡萝卜素、β-胡萝卜素和番茄红素这5种类胡萝卜素类营养物质的分离检测,且单次高效液相色谱检测费时为35分钟。
高效液相色谱检测条件
1 仪器设备
Welch 高效液相色谱仪,WiSys5000,配备二级管阵列检测器;
2 液相色谱柱
分析柱:Ultimate XB-C30色谱柱,4.6mm×250mm, 5μm;
保护柱:Ultimate XB-C30,4.6mm×10mm, 5μm;
3 流动相
A相:甲醇:乙腈=1:1;B相:乙酸乙酯;
4 梯度洗脱程序
5 流速
1.0mL/min;
6 检测波长
476nm;
7 柱温
30℃;
8 进样体积
20μL。
高效液相分离色谱图
从高效液相检测的色谱图看,不仅单次检测,35分钟内实现同时分离检测叶黄素、玉米黄质、α-胡萝卜素、β-胡萝卜素和番茄红素这5种类胡萝卜素类营养物质,而且互为同分异构体的叶黄素和玉米黄质之间,以及α-胡萝卜素和β-胡萝卜素之间,都基本实现了基线分离。
相关色谱耗材
附录A:5种类胡萝卜素天然营养物质的分子结构
附录A:5种类胡萝卜素天然营养物质的分子结构
免责声明
- 凡本网注明“来源:化工仪器网”的所有作品,均为浙江兴旺宝明通网络有限公司-化工仪器网合法拥有版权或有权使用的作品,未经本网授权不得转载、摘编或利用其它方式使用上述作品。已经本网授权使用作品的,应在授权范围内使用,并注明“来源:化工仪器网”。违反上述声明者,本网将追究其相关法律责任。
- 本网转载并注明自其他来源(非化工仪器网)的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品第一来源,并自负版权等法律责任。
- 如涉及作品内容、版权等问题,请在作品发表之日起一周内与本网联系,否则视为放弃相关权利。