一、实验原理
脂肪是丙三醇(甘油)和脂肪酸结合成的脂类化合物,能溶于脂溶性有机溶剂。
本实验用重量法,利用脂肪能溶于脂溶性溶剂的这一特征,用脂溶性溶剂将脂肪提取出来,借蒸发除去溶剂后的称量。整个提取过程均在索氏提取器中进行。通常使用的脂溶性溶剂为Diethyl Ether或沸为30~60℃的石油醚。用此法提取的脂溶性物质除脂肪外,还含有游离脂肪酸、磷脂、固醇、芳香油及某些色素等,故称为“粗脂肪”。
实验程序
(一)操作方法
1.装置索氏脂肪提取器
2.样品的制备
将样品置80~100℃真空烘箱烘至恒重,放冷后研成粉末,称取样品3.00g,放入干燥滤纸筒内,以脱脂棉花盖之。
3.提取
将盛有样品的滤纸筒放入索氏提取器内,注意勿使筒内样品高出提取器的虹吸管加入Diethyl Ether约占提取管容积1/3,以浸湿样品,同时向已知重量的提取瓶内加入约占其容积1/3的Diethyl Ether。
将仪器各部连接如下图,夹稳,并置于恒温水浴锅上,使提取瓶底部浸入水中,开启自来水,使水从冷凝器下孔流入,上孔流出,然后开启水浴锅开关,加热水浴。当温度上升至Diethyl Ether沸点时,Diethyl Ether开始沸腾,并形成蒸汽由连接管上升至冷凝器,蒸气遇冷而成液体,滴入提取管内将样品浸泡,样品的脂肪将逐渐溶于其中,当液面超过虹吸管上端时,溶有脂肪的Diethyl Ether经虹吸管流入提取瓶。调节水浴温度至50~60℃,使Diethyl Ether每小时循环3~5次,提取时间视样品性质而定,通常要12~16h。
4.干燥及称重
提取完毕后,卸下的提取瓶,在水浴上蒸馏回收Diethyl Ether(避免着火)。清洗提取瓶外壁,然后把提取瓶置104℃恒温烘箱中烘至恒重。
5.结果处理
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