您可知elisa试剂盒采用了哪些洗板方法?
ELISA试剂盒中的样品都要做复孔或三孔,然后计算每个浓度规范品的均匀OD值,复孔的变异系数应该小于20%;
制造规范曲线;
均匀OD值减去空白孔的OD值。
以减去底后的OD值为X轴,规范品的浓度为Y轴,利用作图软件得出一个适宜的计算办法。主张运用适宜的软件来作图,这款软件能够给出许多种办法,并从中挑选一条适宜的方程,要想检验某条曲线是否与表中数据符合,能够将规范品的浓度作为未知数,将对应的OD值带入该方程,计算出规范品的浓度,得到的成果应该与实际浓度很接近。
假如出现规范曲线的线性欠好,或平行性欠好(双孔对照孔的OD值差别很大),或出现跳孔的现象,可能引起的原因有酶标板孔间相互污染、洗板后未能赶快进行下一步操作、增加样品或其它试剂时操作的办法不对、孵育方位避光性不佳或盖板膜没有密封好使得水分蒸发、酶标板孔问参加的试剂量不同,相对应的解决办法是加样时请当心勿将液体溅人另一孔中,人工洗板时也请当心,勿将洗涤液溅人另一微孔中、在洗板后及时进行下一步操作、增加试剂时请悬空滴入,切记勿将枪头接触到板孔内,汲取不同试剂瓶中的液体时就要更换一次枪头、承认孵育环境不透光,盖板膜将酶标板密封好、运用已校正过的微量加样器。
ELISA试剂盒可以采用:
手工洗板方法:吸去或甩掉酶标板内的液体,在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次,将推荐的洗涤缓冲液至少0.4毫升注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。
在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
刚开启的酶标板孔中可能会有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
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