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NEPAGENE助力冠状肺炎的治疗性单克隆抗体药物研究

来源:广州市华粤行仪器有限公司   2020年04月13日 14:43  

  随着新guan肺炎的疫情不断升温,3月17日,著名的生物技术公司Trans Chromosomics(TC)在网站发表一项声明,表示已经与美国Precision Antibody(PA)公司达成一项合作协议,共同研发应用于COVID-19的全人源的治疗性单克隆抗体药物。

  日本TC公司创立于2014年,由转基因小鼠领域的著名学者MitsuoOshimura创建。1997年,时任日本Tottori 大学的分子与细胞遗传学部研究员的MitsuoOshimura博士与当时在日本麒麟啤酒公司(Kirin Brewery)任职的Isao Ishida博士合作,通过转染色体的方式,*成功的建立了可以表达全人源抗体蛋白的转基因小鼠。1997年6月,这一成果发表在《自然遗传》(1)上,立刻引起轰动,被《纽约时报》和《华盛顿邮报》等多家媒体报道。用染色体片断做载体,日本研究团队把转基因的极限扩大了至少10倍。这种用新方法改造的小鼠被命名为TC小鼠,或转染色体小鼠。人的抗体库在小鼠的B细胞群里得到完整表达。

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(图片源自TC公司网)

  拥有成熟的转染色体小鼠技术的日本TC公司,通过提供表达全人源抗体的转基因小鼠,与美国PA公司合作进行用于COVID-19的全人源的治疗性单克隆抗体药物研究,这是一场非常有意义的强强联合的合作。后者(PA公司)在抗体获取技术方面有长期的经验和成熟的技术,历年来与许多大型制药公司和国家卫生研究院(NIH)等公共组织合作取得成功。同时,TC公司还与日本国家传染病研究所(NIID)、Tottori 大学紧密合作,共同进行技术攻关,争取早日成功获得COVID-19 治疗性抗体药物。

  据日本TC公司称,有许多公司致力于发现抗COVID-19的治疗药物,例如1)重新利用现有药物,2)发现疫苗,3)单克隆抗体。在现有的各种抗体捕获技术中,TC公司选择DNA免疫法以zui快的速度获得单克隆抗体。TC公司的重点将是在COVID-19的包膜上表达的棘突蛋白(S蛋白),它是病毒进入人体的一个重要部分。

  日本TC公司和美国PA公司都采购了NEPAGENE公司的设备,并将其用于过往、及现今紧锣密鼓进行中的COVID-19相关研究。他们配置了NEPA21全能型高效基因转染系统以及ECFG21细胞融合仪,NEPAGENE公司正为包括他们在内的客户提供全面周到的技术支持。希望我们的研究者,能早日找到防止COVID-19大流行和继续威胁人类生命的方法。

  NEPAGENE公司是世界的电转染和电融合设备研发及生产厂家。借助NEPA21的基因导入功能,研究者可以便捷、高效地进行体外或活体的转基因操作,可用于生产基因组转基因动物,或用于帮助动物免疫,获得治疗性抗体。早在2015年发表在Vaccine的文献报道,应用NEPA21进行小鼠的肌肉电转来导入DNA疫苗用于研究登革热疫苗的研发,获得表达IgG2b或IgG3亚类抗体的小鼠。这项应用也可助力xin冠状病毒有关的疫苗或单克隆抗体研发【2】。

  除此之外,在2017年,NEPA21应用在小鼠肌内或肿瘤部位进行DNA的体外电转,通过在MC38肿瘤模型小鼠中记性肌肉用于一些抗体基因的药代动力学的研究,实验证实,通过电转的方式瞬时性大大提高。

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(文献中部分图示展示,3)

  由于T细胞识别的人类疱疹病毒6B(HHV-6B)表位的鉴定可能有助于开发潜在的疫苗和免疫疗法。 2019年,有作者通过使用NEPA21体内电穿孔的方式,将编码BgQ1的质粒DNA转到小鼠肌肉中,在BALB / c小鼠中鉴定出的CD4 +和CD8 + T细胞表位可能是用于开发T细胞反应,诱导HHV-6B疫苗或免疫疗法的良好动物模型系统。【3】)

  不仅在人类疱疹病毒方面,NEPA21还应用到了登革热病毒(DENV)疫苗的研究中,2019年,日本神户大学,发现编码由抗原和对DC内吞受体DEC205特异的单链Fv抗体(scFv)组成的融合蛋白的DNA疫苗,可诱导对目标抗原的强烈免疫反应。将产生编码与DENV2包膜蛋白结构域III(EDIII)融合的scFvαDEC205或同种型对照(scFv ISO)的质粒在免疫小鼠中评估EDIII特异性免疫,终发现,使用编码scFvαDEC205的DNA疫苗将DENV2 EDIII蛋白靶向DC可以改善抗体和CD4 + T细胞反应。该策略为使用编码针对DC抗原的DNA疫苗作为增加免疫原性的策略开辟了前景【4】。 

  借助ECFG21的细胞融合功能,研究者可进行高效的脾细胞融合获得杂交瘤细胞,或进行卵母细胞激活获得体细胞克隆动物等。美国PA公司经过对比研究发现,对难获得阳性克隆的小分子抗原、多肽类抗原,使用ECFG21的融合效率甚至可达PEG的25~100 倍!

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参考文献

(1) omizuka, K., Yoshida, H., Uejima, H. et al. Functional expression and germline atransmission of a human chromosome fragment in chimaeric mice. Nat Genet 16, 133–143 (1997). 

(2) Atsushi Yamanaka, PannamthipPitaksajjakul, PongramaRamasoota, EijiKonishi
Expression of Enhancing-Activity-Free Neutralizing Antibody Against Dengue Type 1 Virus in Plasmid-Inoculated Mice
Vaccine, 33 (45), 6070-7 2015 Nov 9

(3) Satoshi Nagamata, TaikiAoshi, Akiko Kawabata, Yoshiaki Yamagishi, Mitsuhiro Nishimura, SoichiroKuwabara, Kouki Murakami, Hideto Yamada, Yasuko Mori
Identification of CD4 and H-2K d-restricted Cytotoxic T Lymphocyte Epitopes on the Human Herpesvirus 6B Glycoprotein Q1 Protein
Sci Rep, 9 (1), 3911 2019 Mar 7

(4) Arthur BaruelZaneti,Dendritic Cell Targeting Using a DNA Vaccine Induces Specific Antibodies and CD4 + T Cells to the Dengue Virus Envelope Protein Domain III
Front Immunol, 10, 59 2019 Jan 29 eCollection 2019

 

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