汞是对生物体具有较强毒性的元素之一。环境中汞的浓度相对较低，但是食物链 传递过程会使其浓度增大，终导致一些食品中汞含量很高。此外，其毒性不仅 与其总含量有关，还与其存在形态相关。因此研究食品中汞的存在形态对全面评 价其对人体的潜在危害至关重要。

由于汞形态分析需要较低的检出限，因此 GC-ICP-MS 联用是方法。然而， 随着现代 ICP-MS 系统灵敏度的提高，HPLC 也已开始应用到形态分析中。HPLC 与 ICP-MS 的联用由于其简单快速的技术连接而备受瞩目。此外，与 GC 分析相 比，HPLC 可以对萃取的样品溶液直接进样，不需进行各形态的柱前衍生，大大 简化了样品前处理，节省了总分析流程所需的成本。

本研究工作中，对采用 HPLC-ICP-MS 联用技术进行食 品中汞的形态分析进行了评估。从毒理学角度来说无机 汞（Hg2+）和一甲基汞是主要的目标分析物，但本工作对可 能遇到的乙基汞 (EtHg+) 和苯基汞 (PhHg+) 也作了研究。 通过有机溶剂的梯度洗脱可将各形态分离开来。Agilent 7700/7800 ICP-MS 系统中采用了*的快速频率匹配 的固态射频（RF）发生器，允许在水相和有机相之间轻易 转换而不会影响等离子体的稳定性。通过分析认证标准物 质（CRM）验证了本方法的可靠性。结果表明，安捷伦的 HPLC-ICP-MS 联用系统是进行食品中汞形态分析的完整、 全面集成和有效的解决方案。

仪器 色谱分离采用 Agilent 1260 HPLC。1260 HPLC 大允许 压力可达 600bar，可使用极小粒径的色谱柱进行快速分 离。本工作使用 1.8µm 粒径的 Zorbax C-18 色谱柱（安捷 伦）。。该分离基于 High 等人的之前的工作 进行了优化 [1]。机物可直接进入 ICP-MS，而不会造成接口锥的积碳。使 用铂锥防止氧气加入造成的氧化，同时使用有机分析常用 的内径为 1.0mm 的矩管。

7700/7800 ICP-MS 的 Mass Hunter 工作站能同时控制常 见的安捷伦 LC 和 GC 模块，可以在 ICP-MS Mass Hunter 软件中直接运行 1260 HPLC 方法和序列（图1）。该特性不 但简化了 HPLC-ICP-MS 的联用操作，还增加了此类分析 的安全性，因为双向通讯可保证 HPLC 或 ICP-MS 任何一 方停止运行的时候，该软件可自动停止另一方的运行。

样品前处理 选用两个 CRM 标准物质对方法进行了验证。取自金枪鱼 肌肉组织的标准物质 BCR-464（比利时 IRMM）甲基汞标 准值为 5.12 ± 0.16 mg/kg（以汞计），占总汞的 97%。由 角鲨肝脏制成的 Dolt-4 标准物质（加拿大 NRC）中甲基汞 标准值为 1.33 ± 0.12 mg/kg（以汞计），占总汞的 52%。
样品萃取过程参考前人的工作[2]。称取 150 mg 样品，加入 20 ml 流动相 A，在 140 w 条件下微波消解 11 min，取表 层上清液过 0.45 µm 滤膜后直接进样 HPLC。

结果和讨论：色谱条件优化 初始的汞形态色谱分离条件采用 L-半胱氨酸（A 通道） 中加入 2% 甲醇（B 通道）的等度条件。色谱分离图如图 2 所示。

如图所示，在等度条件下，三种汞形态在三分钟内即可得到 分离，并且 Hg2+ 和 MeHg+ 在两分钟内即可分离。但是苯 基汞却被柱子保留无法检测。因此，为了增强流动相的洗脱能力，试验了梯度洗脱方法。图 3 显示了分离过程中使用 的梯度洗脱程序：初始用 2% 甲醇洗脱，在 1 min 内升高到 90%。

结论 ：
本研究针对食物样品中的汞形态分析开发了快速有效的梯 度洗脱 HPLC-ICP-MS方法。该方法能够在 3 分钟内将样 品中的 4 种目标汞形态物质*分离出来。用标准物质测 定对该方法进行了验证，与标准物质参考值相比较，汞各 形态回收率良好。另外，若无需分离测定苯基汞，该方法则 可进一步简化为等度分离。
安捷伦7700/7800ICP-MS 的射频发生器所具有的快速频率匹配 特性允许流动相由水相快速转换为 90% 甲醇，因此可以在 不影响等离子体稳定性的前提下实现汞形态的分离。这种 特性为有机溶剂流动相 HPLC 分离和 ICP-MS 联机应用带 来了新的可能。