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nanodrop one超微量光度计怎样用

来源:上海旦鼎国际贸易有限公司   2020年02月11日 16:59  

nanodrop one超微量光度计怎样用

Nanodrop是实验室中常见的分光光度计。与传统需要比色皿的分光光度计相比,Nanodrop所需样品的体积大大减少,只需要2 μL,同时也大大降低了实验准备以及清洗的时间。这些优势使得科研人员能够在一分钟内检测多个样品。当然如果你有更多的样品,还嫌效率不够高,你可以选择应用Nanodrop 8000系统,它能够同时检测8个样品。

 

Nanodrop能够在包括紫外及可见光区域在内的光谱范围内检测样品的吸光度信号。在实验开始前,需要在仪器的软件内设置检测样品的种类,包括蛋白质,DNA, RNA等。根据吸光度,能够计算样品的浓度。DNA及RNA 在260 nm处有大吸收度,蛋白质在280 nm处有大吸收峰值。浓度与吸光度的对应关系见下表。当然表中浓度与吸光度对应关系成立的前提是样品必须具有很高的纯度。样品纯度可以通过A260/280判定,其临界值可参考下表。 大家可能注意到,RNA的A260/280比值要比DNA的值高一些,这是因为碱基U的A260/280的比值要比碱基T的A260/280比值更高。

 

吸光度

样品

样品浓度

高纯度样品标准(A260/280 )

A260  =1

双链DNA

50 μg/ml

<1.8

单链DNA

33 μg/ml

单链RNA

40 μg/ml

>2.0

A280  = 1

蛋白质

1 mg/ml

<0.6

 

对Nanodrop检测结果产生直接影响的因素就是样品的纯度。A260/280是检测样品纯度的一个指标,但这个参数只衡量了蛋白质与核酸之间相互污染的情况。没有考虑DNA与RNA之间彼此污染以及其他物质污染的情况,比如苯酚在270 nm附近具有较大的吸光值。

 

因此在利用Nanodrop检测核酸浓度的时候,除了A260/280外,A260/230也是检测样品纯度的一个指标,高纯度DNA和RNA的两个临界值同样是1.8以及2.0。A260/230在2.0-2.2之间是合理的数值。对于纯的核酸,A260/230的值通常大于A260/280的值。核酸提取过程中残留的有机物通常会对检测结果产生影响。如果检测结果显示230nm处具有很大的吸光值,样品很有可能被EDTA,碳水化合物或者硫氰酸胍等物质污染了。

 

Nanodrop的检测范围。对于核酸来说,Nanodrop的检测浓度范围在2ng-15μg/μL之间。所以当样品的浓度很低时,比如从单个或少量细胞中提取的DNA或RNA,利用Nanodrop来测量浓度可能就不适合了。这时需要考虑其他的核酸定量方法比如荧光染料的方法。

nanodrop one核酸蛋白浓度检测

NanoDrop One/NanoDrop OneC 增强功能

  • 符合人体工程学的独立式设计——集成 Android™ 平板无需专门配备计算机,能通过无线网络*、以太网或 USB 实现数据的无缝传输。
  • 自动测量与自动调零功能 ——降下检测臂即可实现即时测量,从而可简化多样品处理流程。仅需触摸一下屏幕,即可打开或关闭这些功能。
  • 动态范围更宽泛——采用自动调节光程技术,无需对高浓度样品(dsDNA 高达 27,500 ng/µL)进行稀释
  • 集成式学习中心——仅需指尖滑动,即可浏览经存档的技术支持文档与教学动画。

 

nanodrop one 提供高级连接功能,可实现数据存储、打印与共享

  • 提供多种数据导出方法:使用 USB、Wi-Fi 或以太网连接,将结果转移至您的电脑,或者通过 Wi-Fi 或以太网将数据直接保存至 Thermo Fisher Cloud。
  • 在电脑上查看、整理并共享数据:一旦导出,您就可使用 NanoDrop One/OneCPC Viewer 软件,查看各种格式的数据(例如污染物分析谱图)并整理试验资料。
  • 简单易用的“数据至打印机”选项:您可通过 Wi-Fi、以太网或 USB 打印机接口,直接从 NanoDrop One 仪器上打印结果;也可使用 Nanodrop One/OneCPC Viewer 软件,从电脑上打印已导出的数据。
  • 全天候实现数据访问:只要您使用 NanoDrop App 采集、分析、存储并共享 NanoDrop One 数据,您就可随时随地在任何设备(基于 Android 系统或基于 iOS 系统的设备、个人电脑或 Mac 台式计算机)上查看数据;NanoDrop App 可在
  • 在线合作:可在没有配备相应仪器的同事之间实现数据共享,并能在多个通过 Thermo Fisher Cloud 连接的账户中查看 NanoDrop One 数据。

nanodrop one核酸蛋白浓度检测

NanoDrop OneC 特点

  • 同时包含基座和比色皿检测模块,以扩展实验灵活性和扩大动态范围。
  • 测量稀释样品,执行动力学实验并获取细菌培养物的光密度测量结果。
  • 比色皿检测模块包括温度控制和搅拌区域。

NanoDrop One/NanoDrop OneC 功能

  • 光谱范围广 (190-850 nm),适合多种样品类型的测量:
    • 多肽 (205 nm)
    • DNA 和 RNA (260 nm)
    • 纯化蛋白质 (280 nm)
    • 毒理学测定和工业染料 (490 nm)
    • 金纳米粒 (520 nm)
    • 比色法蛋白质测定(BCA 562 nm、Bradford 595 nm、改进的 Lowry 650 nm、Pierce 660 660 nm)
    • 光密度测量 (600 nm)
  • 将具有*技术**的样品保留系统与比色皿测定能力相结合,实现对低浓度和高浓度样品的兼容性(2.0 - 27,500 ng/µL dsDNA 及 0.06 - 820 mg/mL BSA)
  • 基座测量仅需 1 – 2 µL 样品,即便是高浓度样品也无需稀释
  • 计算样品纯度比值(A260/A280 nm 及 A260/A230 nm)
  • 针对 DNA、蛋白质 A280、微阵列、蛋白质和标签(标签可改为标记)、Pierce 660、Bradford、BCA 以及 Lowry 设定了预配置方法
  • 用户友好型软件提供自定义方法和数据导出功能

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