Albina等（1992）用PRRSV接种PAM培养，提取PRRSV抗原，建立了检测PRRSV抗体的间接ELISA，当PRRSV抗原孔的OD值与细胞抗原孔的OD值之比大于1．5时，即判断样品为阳性。研究发现ELISA的特异性与IPMA相同，但敏感性更高。由于PAM为原代细胞，难以获得足够的细胞用于制备
PRRSV抗原，Takikawa等（1996）用PRRSV接种MARCl45细胞提取PRRSV抗原，建立了检测PRRSV抗体的ELISA方法，结果表明，ELISA具有比IPMA和IFA更好的特异性和敏感性。由于用MAR~145制备的PRRSV抗原有一定程度的非特异性反应，因此有必要进一步改进。Cho等（1996）利用Triton-X100助溶，从PRRSV感染的MARC-145细胞中制备出高纯度的E1．ISA抗原，这种高质量的抗原应用到检测PRRSV抗体的间接ELISA中，辅以一种有效的封闭剂可消除血清样品的非特异性反应，且这种ELISA比1FA敏感，特别是对感染后期血清具有高度的特异性；具有快速、经济、敏感、适合大量样品的检测、可半自动和自动显示结果等优点，明显优于IPMA和IFA，目前ELISA已作为PRRS检测诊断的常规手段。

当前，病毒病诊断技术的发展趋向于特异强、敏感性高、快速、经济、操作安全简单，能够达到的早期诊断目的，适于大量样品的检测，而且诊断技术都趋向于试剂盒化，PRRS的诊断也不例外。目前，美国IDEXX公司生产用于PRRS的ELISA诊断试剂盒在世界范围内得到了广泛的应用，国内PRRS的诊断试剂盒的市场几乎被美国IDEXX公司垄断，而这种进口ELISA试剂盒价格昂贵，只有条件较好的猪场和实验室才能负担得起。然而，该ELISA试剂盒是用PRRSV全病毒包被酶标板（Steven，et a1，2000），因此，生产厂商要求使用完毕的试剂盒材料必须进行焚烧处理；如果在操作或处理上出现失误，就会存在潜在散毒的危险，我国PRRS的流行也许与该试剂盒的引进和使用不当有关。所以，有必要研究安全不散毒、敏感性高特异性强的PRRSELISA诊断方法。

用重组蛋白作为靶抗原来建立血清学诊断方法就可避免散毒这一弊端，因PRRSV的N蛋白很保守并具有*的免疫原性，所以，在分子生物学基础上建立起来的血清学检测方法都是以原核或真核表达的重组N蛋白为基础（Dea，et a1，2000b~Denac，et a1，1997~Steven，eta[，200％Meulenberg，etal，1995b）。Dea等（2000）用原核表达的重组N蛋白直接溶于4mol／L的盐酸胍，用PBS稀释后就可用于血清学方法的研究，成功地建立了检测PRRSV抗体的ELlSA方法，在感染后的7～10天，可从血清内检测出PRRSV抗体；与1DEXX公司商品化的ELISA诊断试剂盒同时检测542份猪血清，二者检测结果*一致；将5个表位全部（ORF7）或分段进行表达发现，只有完整的重组N蛋白（原核表达）才适合用于PRRS血清学诊断方法的研究（Dea，etal，2000b）。ORF7也有在杆状病毒表达系统中获得表达的报道，所建立的ELISA也显示出较好的诊断效果，但杆状病毒表达系统的表达量远远不及原核表达丰富，且所需试验条件及成本高，并且昆虫细胞培养时加入的胎牛血清易给血清学反应造成非特异性反应，因此，实际应用受到了限制（Denac，etal，1997~Steven，etal，2000）。国内研究者也对ORF7在两个系统的表达进行了研究（仇华吉等，1999。；王云峰等，2000~赵耘等，2001），但没有一个真正试剂盒化的方法出现并应用于PRRS的诊断。M蛋白是欧、美型PRRSV毒株之间zui保守的蛋白，且有较强的免疫原性，在感染后的第10天就可检测出相应的抗体（Meng，et al，1995b~Loemba，et al，1996），因此，PRRSV的M蛋白同样可作为PRRS诊断的靶抗原，但国内外还没有将M蛋白进行表达研究和用于建立诊断方法的报道。如果将N蛋白与M蛋白进行融合表达，用重组蛋白MN建立的ELISA方法也许会得到更好的效果，这一方法值得探讨。