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样品的采集、制备和保存(七)

来源:深圳市诺亚迪化学科技有限公司   2018年06月04日 08:45  

(2)植株样品的制备测定易挥发、分解和转化的待测组分,须用新鲜样品。测定不易起变化的成分可用干燥样品。

①新鲜样品的制备。按实验要求,如需要分不同器官(例如叶片、叶鞘或叶柄、茎、果实等部分)测定,须将采回的植物样品立即剪开,以免待测组分运转。植物样品常带有泥土、灰尘或沾有施用的肥料、农药等,分析前必须洗涤,然后将洗净、擦干的鲜样放入电动高速组织捣碎机中,加入1~2倍的蒸馏水(或去离子水)捣碎,制成匀浆。含水量高的样品,可不加水捣碎。含纤维多或较硬样品,可先切碎成小碎片或小块,用研钵研磨。鲜样如需短期保存,须在冰箱中(一5℃)冷藏,以抑制微生物的活动和防止挥发。

②干燥样品的制备。干燥样品的分析结果如需换算为鲜样的含量时,鲜样经洗净、擦干后应立即称其鲜重,干燥后再称其重。

新鲜样品必须尽快干燥,以减少其化学和生物的变化。若需长距离运输,包装要松散些,包装袋要透风,以免样品因包装过紧发热增强呼吸作用而造成损失。杀酶和干燥要快,并要有足够的高温,但烘干的温度又不能过高,以防止组织外部结成干壳而阻碍内部水分的蒸发和可能引起组织的热分解或焦化。因此一般须分两步干燥,先将鲜样在80~90℃鼓风干燥箱中烘15~30min(松软组织烘15rain,致密坚实的组织烘30min),然后降温至650C,逐尽水分。干燥时间须视鲜样水分含量而定,通常为12~24h。玉米、高梁等多汁硬皮的茎秆不易烘干,可用锋利的刀劈开,但注意勿使其汁液流出。

干燥的样品用研钵或带刀片的磨样机进行粉碎,并使全部过筛。磨样和过筛都应避免使样品沾污,特别是测定微量元素时。测定铁、锰的样品,不要用铁器研磨过筛;测定铜、锌的样品,不要用黄铜器械。一般以用玛瑙研钵或玛瑙球磨粉碎为好,特制的不锈钢磨或瓷研钵也可选用。过筛可用尼龙筛。样品过筛后须充分混匀,保存于磨口的广口瓶中,内外均应贴放标签。

2、籽粒样品的采集和制备

(1)籽粒样品的采集

①从个别植株上采样。谷类或豆类作物从个别植株上采取种子样品时,应考虑栽培条件的一致性。种子脱粒后,去杂、混匀,按四分法缩分为平均样品,质量不少于25g。

②从大田采样。可按照植株组织样品的采样方法,选定样株收获后脱粒,混匀,用四分法缩分,取得约250g样品。大粒种子,如花生、大豆、蓖麻、棉籽、向日葵等可取500g左右。采样时应选取*成熟的种子,因为不成熟的种子其化学成分有明显的差异。

③从成批收获物中取样。在保证样品有代表性的原则下,可从散装堆中设点随机取样,或从包装中随机扦取原始样品,再用四分法或分样器缩分至500g左右。

(2)籽粒样品的制备将采取的籽粒样品风干,去杂和挑去不完善粒,用磨样机或研钵磨碎,使之全部通过0.5~1mm筛,储于广口瓶中,贴好标签备用。

油料作物中的大粒种子,如花生、向日葵、棉籽等,应去掉厚的果壳或种皮,只分析种仁。但棉籽种皮不易剥掉,可先用水浸湿4~6h,再用锋利的小刀将种子切为两半,取出种仁。为了防止油料作物种子在磨碎过程中损失油分,可从采取的样品中用四分法缩分出少量样品,于70~80℃干燥箱内干燥15~18h,取出,在瓷研钵中用杵击碎,不能研磨。大豆和其他含油少的种子则可以直接用磨磨碎,有时要磨2~3次,先粗碎,再细碎。

3、瓜果样品的采集和制备

(1)瓜果样品的采集所谓“瓜果”,这里是泛指果实、浆果和块根、块茎等。瓜果的成熟期延续很长,一般在主要成熟期采样,必要时也可在成熟过程中采2~3次样品,每次应在地块中随机采取10株以上簇位相同、成熟度一致的瓜果组成平均样品。平均样品的果数,较小的瓜果如青椒之类不少于40个;番茄、洋葱、马铃薯等不少于20个;较大的瓜果如西瓜、大萝卜、小萝卜等不少于15个。重以1kg左右为宜。

(2)瓜果样品的制备瓜果样品的分析通常都用新鲜样品。采回的样品应刷洗、擦干。大的瓜果或数量多时,可均匀地切取其中的一部分,但要使所取部分中各种组织的比例与全部样品相当。当样品切成小块用高速组织捣碎机打成匀浆,多点勺取称样。多汁的样品液可在切碎后用纱布挤出汁液,残渣粉碎后再与汁液一起混匀、称样。

4、水生植物的采集

如浮萍、眼子菜、藻类等,一般采集全株,若从污水塘或污染严重的河、塘中捞取样品,须用清水冲洗干净。

(二)动物样品的采集与制备

动物样品主要包括动物的尿液、血液、粪便、毛发、指甲和脏器(肝、肾、胆、肺、胃、肠)等。在这些样品中,血、尿和头发比较容易采集,而且血和尿能反映机体对环境污染物的吸收和排泄情况。检测头发、指甲、脂肪等组织中的污染物,能反映毒物在机体内的蓄积情况。有时脑、肺、肝、肾和骨等器官也是分析测定对象。

1、尿液的采集与制备

绝大多数毒物及其代谢产物主要由肾脏排出体外。收集尿液比较方便,而且不伤害动物,所以尿液是zui常见的环境检验对象。收集尿液的采样瓶要用硝酸浸泡、蒸馏水洗净、烘干后使用。采集时可将动物放在代谢笼中,使动物的尿液经漏斗流人采样瓶中。一般晨尿浓度较高,可一次收集,也可收集2h,甚至24h的尿液。

2、血液的采集与制备

血液可检验微量金属,如汞、铅等,也可检验微量非金属,如氟等。一般多用耳缘静脉取血,先去毛,要去净毛,不伤皮肤,用体积分数为75%的酒精擦动物耳朵,如兔耳朵,用灯泡照射加热使其血管充血,用大头针从远心端刺破静脉放血,用注射器抽血样10mL,放入经洗涤的装有抗凝剂的硬质玻璃试管中,用干棉球压迫血管止血。将血样放入冰箱中保存。然后再将血制成血清、血浆、无蛋白质血滤液等。

3、毛发和指甲的采集与制备

毛发、指甲是机体的一个组成部分,是某些污染物的指示器和微量元素的储存库,也是容易获得的生物材料。采集时不能仅取二三根,必须取大量的头发,可用绳将几个部位上的头发扎成一股,再尽可能贴着头皮将这股头发剪下来。采集到的头发和指甲样品,要用中性洗涤剂处理,去离子水冲洗,再用乙醇洗涤,在室温下充分干燥后装瓶备用。但应注意,清洗样品过程中,既要洗净样品表面附着的污染物,又要不使样品内部的污染物溶出而流失。

4、组织和脏器的采集与制备

动物组织与脏器是积累污染物重要而复杂的部位,对检测毒物的毒性与毒性研究有指导意义。肝:剥离被膜,取右叶的前上方表层部在表面下几厘米纤维组织丰富的部分作样品。

胃:剥去被膜,分别取皮质和髓质部分,避免在皮质与髓质接合处采样。心、肺、脾:根据研究与测定的需要而决定采集部位,心脏取心尖部、肺取右中叶、脾取一半作样品。然后用剪刀迅速剪碎,再与适当的缓冲溶液混合,用组织匀浆器、绞肉机等制成匀浆。

 

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