一． 原理

  凯氏法测定样品中的含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白含量。

二． 试剂

1. 硫酸：化学纯，含量为98%，无氮。
2. 混合催化剂：1g硫酸铜，9g硫酸钾，均为化学纯，磨碎混匀。
3. 氢氧化钠：化学纯，40%水溶液（m/v）。5%水溶液（m/v）
4. 硼酸：化学纯，2%水溶液（m/v）。
5. 混合指示剂：甲基红0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿0.5%乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月。
6. 盐酸标准溶液：c(HC1)=0.1mol/L。8.3ml盐酸（分析纯），注入1000ml蒸馏水中。
7. 硼酸吸收液：2%硼酸溶液（20 g/L）：称取100 g 硼酸，加水溶解后并稀释至5000 mL。加入（1：3.5混合指示剂6ML）摇匀，再加入5%的氢氧化钠稀释溶液0.35ML摇匀，颜色呈紫红色。

三． 仪器设备

1. 实验室用样品粉碎剂或研钵
2. 分样筛：40目（孔径0.45mm）
3. 分析天平：感量0.0001g
4. 消化炉（SKD-08S2）
5. 容量瓶100ml
6. 滴定管：10、25ml
7. 消化管：300ml
8. 定氮仪(SKD-2000)

四． 样品的选取和制备

  样品粉碎后全部通过40目筛，装于密封容器中，防止样品成分的变化。

五． 分析步骤

1. 样品的消化

称取样品0.5~1g(含氮量5~80mg)准确至0.0002g，放入消化管中，加入5g混合催化剂，与样品混合均匀，再加入10ml硫酸，将消化管置于消化炉上加热，直至呈透明的蓝绿色，然后在继续加热，至少30分钟。

1. SKD-08S2消化炉
2. 6个样品和2个空白）
3. ”SET”键+“A/M”键3秒，跳出第二设置区程序参数修改界面。连续按“SET”键数次出来
4. “RUN”=“3”，pro= “ 1 ”  ，再设置r1 =200，T1=5分钟，c1=180度，r2=180，T2=5,C2=250度，r3=180， T3=5, C3=350度，r4=200，T4=60，c4=410，r5=0，T5=0,C5=0度。。。。r32=0,t32=0,c32=0,设置好后等几秒钟，程序会自动保存。
5. -----------程序自动运行，自动结束。如果出现不运行，再检查“RUN”设置为“3”，pro= “ 1 ”  。

1. SKD-2000全自动定氮仪
2.  
3. 45ml，稀释液40ml，标准酸0.0953（mo/l），蒸馏功率100%，蒸馏时间6分钟，硼酸仪器自动加。
4.  

平均值：12.8245

RSD（相对标准偏差值）: 0.002%