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供货周期 | 现货 | 规格 | 2×100ml |
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货号 | S20202 | 应用领域 | 医疗卫生,生物产业 |
产品货号:S20202
产品规格:2×100ml
产品简介:
苏木素伊红(HE)染色试剂盒,简称 HE 染色,是病理学常规制片中基本的染色方法, 应用极其广泛。苏木精是从原产中南美的洋苏木中提取出来的浅黄褐色的结晶,是一种碱性染色剂,它在 被氧化后生成苏木素,同媒染剂(常用的是三价的铝或盐铁)一起使用,能够使细胞核染色。在病理诊断、教 学和科研工作中,常用 HE 染色对正常组织和病变组织进行形态结构观察。对于确定或鉴别病变组织、细 胞中出现的某些异常物质不特殊成分,而需要采用的特殊染色方法、酶组织化学方法、免疫组织化学方法 等也均是在观察HE 染色组织切片的基础上进行的。在 HE 染色的组织切片中,细胞核呈蓝色,细胞浆呈 红色,二者形成鲜明的对比,易于观察分析。
苏木素染色液采用 尚宝生物 自主研发的配方,由进口的高纯度苏木 精、氧化剂等组成,不含甲醇等有害物质,对细胞核染色效果好。其特点是不易产生沉淀和金属; 应 用范围广,可以用于人、动物、畜牧、水产等领域,可以用于组织石蜡切片、冰冻切片和组织细胞的染色 等;苏木素染色液可以重复使用。
染色原理:
1、细胞核染色的原理:
苏木素为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是 DNA,在 DNA双螺旋结构 中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使 DNA 双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易不带正电荷的苏木 素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。
2、细胞浆染色的原理:
伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两 性化合物,细胞浆的染色不染液的 pH 值密切相关。当染色液 pH 值在胞浆蛋白质等电点(4.7~5.0)以下时, 胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电 荷的阴离子,不胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。
3、分化作用:
染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分化作用,所用的溶液称为 分化液。在 HE 染色中常用 1%盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏木素的醌型结构,使组织不色素分离 而退色。大多数组织经苏木素染色后,必须用 1%盐酸乙醇分化,使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去,再进行伊红染色,才能保证细胞核不细胞浆染色的分明。
4、返蓝作用:
分化之后,苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,呈红色;在碱性条件下处于蓝色离子状态,呈蓝 色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色,立即用水除去组织切片上的酸而中止分化,再用弱碱性 水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色,这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。另外用自来水浸洗也可使细胞核 返蓝,但所需时间较长。
产品组成:
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
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试剂(A): 苏木素染色液 | 100ml | 室温,避光 |
试剂(B): 伊红染色液 | 100ml | 室温,避光 |
自备材料:
1、盐酸乙醇分化液
2、蓝化液,如稀氨水、碳酸锂溶液等
3、系列乙醇
4、4%多聚甲醛
操作步骤:
(一)石蜡切片染色
1、切片脱蜡至水
①二甲苯作用 2 次,每次 5~10min。
②(可选)无水乙醇作用 2 次,每次 3~5min。
③95%的乙醇 3~5min
④90%的乙醇 3~5min
⑤80%的乙醇 3~5min
⑥自来水或蒸馏水 1~3min
2、染色
①苏木素染色液染色 5~8min
②自来水或蒸馏水冲洗 5~10s
③(可选)盐酸乙醇分化 2~5s
④自来水冲洗 20~30s
⑤蓝化液返蓝 20~40s
⑥自来水冲洗 30~60s
⑦伊红染色液染色 3~5min
⑧自来水冲洗 1~5s
2、脱水、透明、封固
①80%乙醇 10~20s
②90%乙醇 10~20s
③95%乙醇作用 2 次,每次 1~2min。
④无水乙醇作用 2 次,每次 2~3min。
⑤二甲苯透明 3 次,每次 2~3min。
⑥中性树脂封片。
染色结果:
细胞核呈蓝色;细胞质、肌纤维、胶原纤维、甲状腺胶质等呈深浅不一的红色;角蛋白、红细 胞等呈明亮的橙红色。
(二)冰冻切片染色
1、乙氧基乙烷混合固定液 5~10s
2、自来水冲洗 2~5s
3、苏木素染色液滴染 1~2min(可加热至 50℃)。
4、自来水冲洗 2~5s
5、(可选) 盐酸乙醇分化 2~5s
6、自来水冲洗 2~5s
7、蓝化液返蓝 2~5s
8、自来水冲洗 5~10s
9、伊红染色液染色 2~5s
10、自来水冲洗 1~2s
11、80%的乙醇 1~2s
12 、95%的乙醇 1~2s
13、无水乙醇 2~5s
14、苯酚二甲苯(1:3) 2~5s
15、二甲苯透明 3 次,每次 2~5s 16、中性树脂封片
备选方案:
1、无需脱蜡,直接迅速用蒸馏水冲洗 2~3min。
2、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤。
染色结果:
细胞核呈蓝色;细胞质、纤维呈红色。
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