细胞凋亡染色试剂盒 返回列表页

产品货号：R21807

产品规格：100T

产品简介：

  尚宝生物生产的Hoechst33342/PI细胞凋亡染色试剂盒为您提供了一种经典而又快速简便的细 胞凋亡与细胞坏死检测方法。本试剂盒采用 Hoechst 33342 和碘化丙啶(Propidium Iodide，PI)双染的方 法。细胞发生凋亡时，染色质会固缩。Hoechst33342 可以穿透细胞膜，染色后凋亡细胞荧光会比正常细胞 明显增强。碘化丙啶(PI)不能穿透细胞膜，对于具有完整细胞膜的正常细胞或凋亡细胞不能染色。而对于 坏死细胞，其细胞膜的完整性丧失，碘化丙啶(PI)可以染色坏死细胞。上述两种染料双染后，使用流式细 胞仪或荧光显微镜检测时，正常细胞为弱红色荧光＋弱蓝色荧光，凋亡细胞为弱红色荧光＋强蓝色荧光， 坏死细胞为强红色荧光＋强蓝色荧光。参考下图，左图为诱导凋亡前的正常细胞，右图为诱导凋亡后的细 胞。

染色快速方便，两种染料的染色仅需 20-30 分钟，一步染色即可完成。使用方便，使用流式细胞仪检测 时，无需稀释等配制过程，也无需再准备其它任何溶液。本试剂盒足够检测 100 个样品，每个样品的细胞 数量可以为 1×10 5-1×10 6。

产品内容：

操作步骤：

1. 每个样品收集约 10-100 万细胞于 1.5ml 离心管内，离心弃上清。细胞沉淀用 0.8-1ml 细胞染色缓冲液 重悬。

2. 加入 5 微升 Hoechst 染色液。

3. 加入 5 微升 PI 染色液。

4. 混匀，冰浴或 4℃孵育 20-30 分钟。

5. 用流式细胞仪检测红色荧光和蓝色荧光。

6. 如果使用荧光显微镜检测，检测前离心沉淀细胞，用 PBS 洗涤一次，再涂片观察红色荧光和蓝色荧光。 对于贴壁细胞使用荧光显微镜检测，可以不收集细胞，直接依次按照上述比例加入细胞染色缓冲液、Hoechst 染色液和 PI 染色液冰浴或 4℃染色 20-30 分钟。染色后 PBS 洗涤一次，再在荧光显微镜下观察。

注意事项：

1. 需使用流式细胞仪进行红色和蓝色双荧光检测。也可使用荧光显微镜检测。

2. 染色后宜尽快检测。

3. Hoechst 33342 对人体有害，碘化丙啶(PI)对人体有刺激性，请注意适当防护。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件：

4℃保存六个月有效，-20℃保存一年有效。Hoechst 染色液和 PI 染色液需避光保存