全新化学成分确定CHO细胞培养基惠诚现货 返回列表页

全新化学成分确定CHO细胞培养基惠诚现货AltairCHO® Medium

AltairCHO™是完(空格)全化学成分确定（Chemically-defined）基础培养基，不含水解物、蛋白、生长因子及任何动物来源的成分，适合于不同亚型中国仓鼠卵巢细胞（CHO-K1、CHO DG44 和 CHO-S 细胞）的高密度悬浮培养，可实现重组蛋白和抗体的高水平表达。AltairCHO基础培养基与全新一代高性能补料AltairCHO™Feed或 VegaCHO™ Feed 联用，可支持细胞高密度生长及活率维持，实现更高水平的蛋白/抗体表达和质量。

应用范围 

AltairCHO™ 可应用于 CHO 细胞的复苏、传代以及高密度流加培养。该基础培养基适用于科研和基于细胞培养的大规模生物制品的生产，但不可直接用于人体或作为药物使用。

储存：2~8℃冷藏，干燥避光保存 

运输：常温（液体）、冷藏（干粉）

液体培养基配制方法 

AltairCHO 培养基不含谷氨(空格)酰胺和碳酸(空格)氢钠。

1. 取最终配制体积 90%的超纯水，水温 25~35°C（注：一次性配制体积不低于 1L）；

2. 称量 19.65 g/L 干粉培养基，缓慢加入水中并搅拌，待粉末完(空格)全分散后，再继续搅拌10 分钟，容器边缘残留干粉应将其全部冲入； 

3. 称量 2.22g/L 碳酸(空格)氢钠，加入水中并搅拌； 

4. 缓慢加入 5N NaOH 调节 pH 到 8.3~8.5，搅拌 20~30 分钟，此时应完(空格)全溶解； 

5. 缓慢加入 5N HCl 将 pH 调回至 7.0； 

6. 加超纯水定容到最终配液体积，继续搅拌 5 分钟，测 pH，用 5N NaOH 或 5N HCl 将pH 调至7.0；

7. 取样测渗透压，加入 NaCl 调节渗透压至 285±10 mOsm/kg（渗透压计算公式：NaCl 添加量（g）=配液体积（L）×（285-检测值）/ 31.5）；

8. 继续搅拌 10 分钟，无菌过滤到合适容器

培养条件 

温度 37℃，湿度 80%，5~8% CO2 

摇床设置：转速 110~150 rpm（振幅 50 mm）

细胞复苏 

1. 在 37℃水浴中快速（＜2 min）融化冷冻的细胞； 

2. 将冷冻管中的细胞液全部转移到 125 mL 含有 30mL 预温过的 AltairCHO™ 培养基的摇瓶中；

3. 放入 37℃，5~8% CO2，转速 110~130 rpm（振幅 50 mm），湿度 80%的摇床中培养；

4. 细胞至少传代 2 次，待其完(空格)全复苏，细胞倍增时间（Population Doubling Time，PDT）稳定后，可按计划进行后续操作。

全新化学成分确定CHO细胞培养基惠诚现货AltairCHO® Medium

细胞传代 

1. 将 AltairCHOTM培养基放入 37℃条件下预热 20-30 min； 

2. 取细胞密度≥1×106 cells/ml、活率≥90%、处于对数生长期中期的细胞进行传代；

3. 按接种密度为 0.5×106 ~ 1.0×106 cells/L 的最终传代体积，计算所需种子液量；

4. 无菌转移所需量的种子液，添加至含所需体积的已预热的 AltairCHOTM培养基的摇瓶中；

5. 将摇瓶放入温度 37℃，湿度 80%，转速 110~150 rpm（振幅 50 mm），5%~8% CO2的细胞培养摇床中进行培养； 6. 每 2~3 天用新鲜的培养基按上述步骤进行传代培养。