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详细介绍
兔胃平滑肌细胞
培养基：原代成纤维细胞培养体系
传代特性：根据细胞特性
消化液：0.25%胰dan白酶
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
细胞简介：胃壁一般由 3层组织构成，内层是粘膜层，外层是浆膜层,中间是由平滑肌组成的肌层。胃平滑肌瘤是常见的胃良性间叶组织肿瘤，起源于中胚层组织。因此，胃平滑肌细胞的体外培养为研究胃平滑肌瘤提供了前提和基础。
一、细胞基本属性
细胞名称 | 兔胃平滑肌细胞 | 商品货号 | A01X2049 |
组织来源 | 正常胃组织 | 种属来源 | 兔 |
产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 生长特性 | 贴壁 |
换液频率 | 每2-3天换液一次 | 细胞形态 | 长梭形，不规则细胞 |
原代细胞分离培养的思路：
取材--分离--培养--鉴定
首先将组织从机体中取出，经胰dan白酶/胶原酶处理后分散成单细胞，再在合适的培养基中培养，使细胞繁殖到一定系数后进行细胞鉴定。
实验步骤：
一、取7-10d雄性SD大鼠，颈椎脱臼处死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min。
二、在超净工作台中，将大鼠断头置于玻璃培养皿中，打开颅腔后取出全脑,放在盛有预冷的PBS玻璃培养皿中，去除小脑和间脑。
三、将大脑半球在干滤纸上缓慢滚动以去除软脑膜和脑膜大血管，再放在新的盛有预冷的PBS玻璃培养皿中。
四、用细解剖镊去除大脑白质、残余大血管和软脑膜，保留大脑皮质。
五、大脑皮质放于DMEM中，剪碎成约1mm3大小，放入50ml的离心管中，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型胶原酶，0 .025-0 .05％IV型胶原酶，200-400U DNaseI)，混匀后37℃水浴消化1-1.5h。
六、室温1 000×g离心8min，去上清液。
七、沉淀中加入20％BSA重悬浮，充分混匀，1 000×g，20min，4℃离心，去上清。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的胶原酶/分散酶，0.05-0.1％I型胶原酶，100-300U DNaseI )重悬浮，混匀，37℃水浴消化0.5-1h，700×g室温离心6min，去上清液。
九、沉淀加入2ml DMEM培养液悬浮混匀，铺于经离心形成连续梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g，60min，4℃)，1000×g，4℃离心10min。
十、靠近底部的红细胞层之上的白黄色的层面即为纯化的微血管段，吸出后DMEM漂洗两次(离心1000×rpm，6min，室温)，去上清液。
加入DMEM培养液(20％FBS，4ug/ml素 )重悬浮，接种于含5％的大鼠 血清37℃孵育过夜所制备的细胞培养皿中，置于37℃、5％CO2培养箱内静置培养24h后更换不含素的混合培养基，随后隔天换液。
公司正在出售的产品：
大鼠睾丸间质细胞 | 小鼠骨髓肥大细胞 |
磷化MLKL重组兔单克隆抗体 | PE-Cy5标记的KCTD4蛋白抗体 |
小鼠骨髓基质干细胞 | PE-Cy5标记的G蛋白偶联受体83抗体 |
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小鼠股骨头微血管内皮细胞 | PE-Cy5标记的烟碱型乙酰受体A2(神经型)抗体 |
小鼠B淋巴细胞 | PE-Cy5标记的黑色瘤相关抗原B6抗体 |
小鼠T淋巴细胞 | PE-Cy5标记的转录因子WSTF抗体 |
小鼠单核细胞 | PE-Cy5标记的胶质细胞谷氨运载蛋白2抗体 |
小鼠DC细胞 | PE-Cy5标记的系统性红斑狼疮相关蛋白TREX1抗体 |
小鼠NK细胞 | PE-Cy5标记的同源异型盒基因HLX1蛋白抗体 |
小鼠内皮祖细胞 | PE-Cy5标记的神经丛蛋白A3抗体 |
小鼠脾基质细胞 | 兔胃平滑肌细胞PE-Cy5标记的细胞纤毛内转运同源蛋白172抗体 |
小鼠脾源性内皮祖细胞 | PE-Cy5标记的磷化DNA修复Ku70抗体 |
小鼠淋巴管内皮细胞 | PE-Cy5标记的CD10单克隆抗体 |
小鼠星形胶质细胞 | PE-Cy5标记的血管紧张Ⅱ-1型受体抗体 |
注意事项：
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中，yi酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部沟通；由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
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