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详细介绍
兔肾小球系膜细胞
培养基：原代肾系膜细胞培养体系
传代特性：根据细胞特性
消化液：0.25%胰dan白酶
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
细胞简介：肾系膜细胞是肾小球内非常活跃的细胞，具有分泌细胞基质、产生细胞因子、吞噬和清除大分子物质及类似平滑肌细胞收缩的功能。同时还可产生和降解多种细胞外基质，参与系膜基质及肾小球基底膜的修复与更新，在肾小球生理功能和病理反应中起着重要作用。
一、细胞基本属性
细胞名称 | 兔肾小球系膜细胞 | 商品货号 | A01X2080 |
组织来源 | 正常肾组织 | 种属来源 | 兔 |
产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 生长特性 | 贴壁 |
换液频率 | 每2-3天换液一次 | 细胞形态 | 长梭形，不规则细胞 |
原代细胞分离培养的思路：
取材--分离--培养--鉴定
首先将组织从机体中取出，经胰dan白酶/胶原酶处理后分散成单细胞，再在合适的培养基中培养，使细胞繁殖到一定系数后进行细胞鉴定。
实验步骤：
一、取7-10d雄性SD大鼠，颈椎脱臼处死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min。
二、在超净工作台中，将大鼠断头置于玻璃培养皿中，打开颅腔后取出全脑,放在盛有预冷的PBS玻璃培养皿中，去除小脑和间脑。
三、将大脑半球在干滤纸上缓慢滚动以去除软脑膜和脑膜大血管，再放在新的盛有预冷的PBS玻璃培养皿中。
四、用细解剖镊去除大脑白质、残余大血管和软脑膜，保留大脑皮质。
五、大脑皮质放于DMEM中，剪碎成约1mm3大小，放入50ml的离心管中，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型胶原酶，0 .025-0 .05％IV型胶原酶，200-400U DNaseI)，混匀后37℃水浴消化1-1.5h。
六、室温1 000×g离心8min，去上清液。
七、沉淀中加入20％BSA重悬浮，充分混匀，1 000×g，20min，4℃离心，去上清。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的胶原酶/分散酶，0.05-0.1％I型胶原酶，100-300U DNaseI )重悬浮，混匀，37℃水浴消化0.5-1h，700×g室温离心6min，去上清液。
九、沉淀加入2ml DMEM培养液悬浮混匀，铺于经离心形成连续梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g，60min，4℃)，1000×g，4℃离心10min。
十、靠近底部的红细胞层之上的白黄色的层面即为纯化的微血管段，吸出后DMEM漂洗两次(离心1000×rpm，6min，室温)，去上清液。
加入DMEM培养液(20％FBS，4ug/ml素 )重悬浮，接种于含5％的大鼠 血清37℃孵育过夜所制备的细胞培养皿中，置于37℃、5％CO2培养箱内静置培养24h后更换不含素的混合培养基，随后隔天换液。
公司正在出售的产品：
小鼠真皮微血管内皮细胞 | 大鼠DRG神经元细胞 |
吲哚乙抗体/植物生长抗体 | PE-Cy3标记的DTX3L蛋白抗体 |
大鼠脑血管周细胞 | PE-Cy3标记的促代谢型谷氨受体7抗体 |
大鼠脑膜细胞 | PE-Cy3标记的CD68抗体 |
大鼠脑皮层神经元细胞 | PE-Cy3标记的赖氨tRNA的连接抗体 |
大鼠海马神经元细胞 | PE-Cy3标记的胸腺高迁移率族蛋白TOX抗体 |
大鼠脊髓神经元细胞 | PE-Cy3标记的3-羟丁脱氢抗体 |
大鼠雪旺细胞 | PE-Cy3标记的溶质载体家族13成员2抗体 |
大鼠星形胶质细胞 | PE-Cy3标记的Verprolin同源结构域包含蛋白3抗体 |
大鼠小胶质细胞 | PE-Cy3标记的弹性蛋白微原纤维界面因子2抗体 |
大鼠少突胶质细胞 | PE-Cy3标记的线粒体核糖体蛋白S17抗体 |
大鼠神经胶质细胞 | 兔肾小球系膜细胞PE-Cy3标记的半乳糖神经酰胺抗体 |
大鼠脑动脉平滑肌细胞 | PE-Cy3标记的干扰α17抗体 |
大鼠神经干细胞 | PE-Cy3标记的细胞质连接蛋白1抗体 |
大鼠角膜基质细胞 | PE-Cy3标记的锌指蛋白ZNF919抗体 |
注意事项：
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中，yi酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部沟通；由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
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