详细介绍
组织来源:正常肾组织
种属来源:兔
细胞简介:肾小球是肾元中的用于将血液过滤生成原尿的一团毛细血丛。在肾小球内,微血管受到高压,而加速了超滤作用的进行。肾小球过滤膜从内到外有三层:内层、中层和外层。其中,内层为内皮细胞层,附着在肾小球基底膜内。
培养基:原代内皮细胞培养体系
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:圆形,多角形细胞
传代特性:根据细胞特性
消化液:0.25%胰dan白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
一、细胞基本属性
产品名称 | 产品规格 | 商品货号 |
兔肾小球内皮细胞 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | A01X2081 |
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
兔肾小球内皮细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈圆形,多角形细胞,在技术部标准操作流程下,细胞可传2-3代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml培养基终止消化;
3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4)待细胞贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml培养基终止消化;
3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml培养基重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
4)待细胞贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的培养基(37℃预热)。
5)原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
公司正在出售的产品:
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磷化真核翻译起始因子4E重组兔单克隆抗体 | PE-Cy3标记的泛激活2/泛激活E1相关蛋白抗体 |
大鼠DC细胞 | PE-Cy3标记的钠钙交换蛋白3抗体 |
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大鼠内皮祖细胞 | PE-Cy3标记的透明质2/玻璃2抗体 |
大鼠脾基质细胞 | PE-Cy3标记的FAM57B蛋白抗体 |
大鼠脾源性内皮祖细胞 | PE-Cy3标记的受体活性修饰蛋白3抗体 |
大鼠淋巴管内皮细胞 | PE-Cy3标记的血管生成-1抗体 |
大鼠淋巴管成纤维细胞 | PE-Cy3标记的血栓A2受体抗体 |
大鼠骨髓肥大细胞 | PE-Cy3标记的SEC14样蛋白L3抗体 |
大鼠骨髓单核细胞 | PE-Cy3标记的甘肽S转移M3抗体 |
大鼠脾淋巴细胞 | 兔肾小球内皮细胞PE-Cy3标记的组蛋白替换精蛋白DGGR1抗体 |
大鼠骨髓巨噬细胞 | PE-Cy3标记的生长分化因子9抗体 |
大鼠脊髓微血管内皮细胞 | PE-Cy3标记的7号染色体开放阅读框29抗体 |
大鼠脑血管成纤维细胞 | PE-Cy3标记的细胞骨架4.1蛋白家族DAL1抗体 |
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。