详细介绍
组织来源:气管
种属来源:兔
细胞简介:兔气管平滑肌细胞分离自气管组织;气管(Trachea),呼吸器官的一部分;为后壁略平的圆筒型管状。上端平第六颈椎下缘,与环状软骨相连;向下至第四、五胸椎体(相当胸骨角平面)交界处,分左、右主支气管,分叉处称为气管杈。气管主要由14-16个半环状软骨构成,有弹性,软骨为“C"字形的软骨环,缺口向后,各软骨环以韧带连接起来,环后方缺口处由平滑肌和致密结缔组织连接,保持了持续张开状态。管腔衬以粘膜,表面覆盖纤毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空气中的灰尘颗粒,纤毛不断向咽部摆动将粘液与灰尘排出,以净化吸入的气体。气管平滑肌是气管的重要结构组成之一,在机体的正常生理过程中发挥着重要作用;能够保持气道张力,维持气道管状形态,从而有利于气体流通,保持肺部通气。气管平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态:大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。气管平滑肌细胞的异常是呼吸道疾病的重要病理特征之一,其增生、肥大是气道重塑的关键。
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传5代左右;3代以内状态佳
消化液:0.25%胰dan白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
传代比例:1:2
一、细胞基本属性
产品名称 | 产品规格 | 商品货号 |
兔气管平滑肌细胞 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | A01X2012 |
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
兔气管平滑肌细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈成纤维细胞样,在技术部标准操作流程下,细胞可传2-3代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml培养基终止消化;
3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4)待细胞贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml培养基终止消化;
3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml培养基重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
4)待细胞贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的培养基(37℃预热)。
5)原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
公司正在出售的产品:
小鼠微血管周细胞 | 人结膜下囊成纤维细胞 |
VSV-G tag标签抗体 | PE-Cy3标记的细胞角蛋白72抗体 |
人舌表皮细胞 | PE-Cy3标记的磷化蛋白激C抗体 |
人视网膜色上皮细胞 | PE-Cy3标记的毛细管形态发生蛋白1抗体 |
人脉络膜成纤维细胞 | PE-Cy3标记的谷氨受体红藻氨离子2/3抗体 |
人视网膜muller细胞 | PE-Cy3标记的干扰诱导蛋白p58ipk抗体 |
人视网膜微血管内皮细胞 | PE-Cy3标记的锌指蛋白154抗体 |
人牙龈干细胞 | PE-Cy3标记的GTSF1L蛋白抗体 |
人牙龈上皮细胞 | PE-Cy3标记的干扰-γ/IFN-γ抗体 |
人口腔成纤维细胞 | PE-Cy3标记的胞脱氨抗体 |
人鼻腔黏膜上皮细胞 | PE-Cy3标记的氢钾ATP通道蛋白抗体 |
人喉黏膜上皮细胞 | 兔气管平滑肌细胞PE-Cy3标记的脊髓性肌症蛋白SMA抗体 |
人眼眶成纤维细胞 | PE-Cy3标记的谷氨受体3B抗体 |
人颊黏膜成纤维细胞 | PE-Cy3标记的肿瘤抑制基因LUCA15抗体 |
人胎盘周细胞 | PE-Cy3标记的胞质紧密粘连蛋白1/闭锁小带蛋白1抗体 |
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。