详细介绍
兔舌表皮细胞
培养基:原代角质形成细胞培养体系
传代特性:根据细胞特性
消化液:0.25%胰dan白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:舌表皮细胞经常轻度教化脱落,与唾液和食物碎屑混合而形成一层白色薄苔。表皮细胞的主要作用是保护,同时还兼有其他功能,如分泌角质层等,具有很强的角质化特征。
一、细胞基本属性
细胞名称 | 兔舌表皮细胞 | 商品货号 | A01X2229 |
组织来源 | 舌 | 种属来源 | 兔 |
产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 生长特性 | 贴壁 |
换液频率 | 每2-3天换液一次 | 细胞形态 | 铺路石状细胞,不规则细胞 |
原代细胞分离培养的思路:
取材--分离--培养--鉴定
首先将组织从机体中取出,经胰dan白酶/胶原酶处理后分散成单细胞,再在合适的培养基中培养,使细胞繁殖到一定系数后进行细胞鉴定。
实验步骤:
一、取7-10d雄性SD大鼠,颈椎脱臼处死,浸泡于75%乙醇消毒3-5min。
二、在超净工作台中,将大鼠断头置于玻璃培养皿中,打开颅腔后取出全脑,放在盛有预冷的PBS玻璃培养皿中,去除小脑和间脑。
三、将大脑半球在干滤纸上缓慢滚动以去除软脑膜和脑膜大血管,再放在新的盛有预冷的PBS玻璃培养皿中。
四、用细解剖镊去除大脑白质、残余大血管和软脑膜,保留大脑皮质。
五、大脑皮质放于DMEM中,剪碎成约1mm3大小,放入50ml的离心管中,加入混合酶液I(0.05-0 .1%II型胶原酶,0 .025-0 .05%IV型胶原酶,200-400U DNaseI),混匀后37℃水浴消化1-1.5h。
六、室温1 000×g离心8min,去上清液。
七、沉淀中加入20%BSA重悬浮,充分混匀,1 000×g,20min,4℃离心,去上清。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1%的胶原酶/分散酶,0.05-0.1%I型胶原酶,100-300U DNaseI )重悬浮,混匀,37℃水浴消化0.5-1h,700×g室温离心6min,去上清液。
九、沉淀加入2ml DMEM培养液悬浮混匀,铺于经离心形成连续梯度的12ml 50%Percoll(25 000×g,60min,4℃),1000×g,4℃离心10min。
十、靠近底部的红细胞层之上的白黄色的层面即为纯化的微血管段,吸出后DMEM漂洗两次(离心1000×rpm,6min,室温),去上清液。
加入DMEM培养液(20%FBS,4ug/ml素 )重悬浮,接种于含5%的大鼠 血清37℃孵育过夜所制备的细胞培养皿中,置于37℃、5%CO2培养箱内静置培养24h后更换不含素的混合培养基,随后隔天换液。
公司正在出售的产品:
大鼠脂肪间充质干细胞 | 大鼠颌下腺上皮细胞 |
麦芽糖结合蛋白单克隆抗体 | PE-Cy3标记的核孔蛋白NUP205抗体 |
大鼠肾集合管上皮细胞 | PE-Cy3标记的四聚体多肽蛋白21B抗体 |
大鼠输尿管成纤维细胞 | PE-Cy3标记的神经丝蛋白单克隆抗体 |
大鼠肾周肌成纤维细胞 | PE-Cy3标记的原钙粘附蛋白α2抗体 |
大鼠肾近端小管上皮细胞 | PE-Cy3标记的磷化Rad51抗体 |
大鼠肾上皮细胞 | PE-Cy3标记的锌指蛋白Aiolos抗体 |
大鼠膀胱间质细胞 | PE-Cy3标记的肿瘤蛋白P53诱导蛋白11抗体 |
大鼠甲状腺上皮细胞 | PE-Cy3标记的磷化活化T细胞核因子1蛋白抗体 |
大鼠甲状腺成纤维细胞 | PE-Cy3标记的Src原癌基因抗体 |
大鼠胰腺星状细胞 | PE-Cy3标记的细胞骨架相关蛋白1/微管蛋白折叠辅助因子B抗体 |
大鼠胰岛细胞 | 兔舌表皮细胞PE-Cy3标记的组蛋白H3单克隆抗体 |
大鼠垂体细胞 | PE-Cy3标记的G蛋白偶联受体GPR158蛋白抗体 |
大鼠胸腺上皮细胞 | PE-Cy3标记的蛋白调解因子8抗体 |
大鼠输卵管平滑肌细胞 | PE-Cy3标记的EDC3蛋白抗体 |
注意事项:
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,yi酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。