人乳腺成纤维细胞组织处理缓冲液

悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入*培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入*培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
产品名称：人乳腺成纤维细胞组织处理缓冲液
规格：100ml

贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml*培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
Anti-HPV16/18 protein/FITC 荧光素标记人类状瘤病毒16/18抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Anti-phospho Histone H1,4(pSer27)/FITC 荧光素标记抗磷酸化组蛋白H1,4样蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh AT1R/AGTR1 血管紧张素Ⅱ-1型受体抗体 规格 0.1ml

Mouse Anti-human IgG(3D3)/AP 碱性磷酸酶(AP)标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 0.1ml

GPX2 英文名称： 谷胱甘肽过氧化酶2抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的兔抗小鼠IgG-Fc 规格 0.1ml

Anti-phospho Histone H1,4(pSer27)/FITC 荧光素标记抗磷酸化组蛋白H1,4样蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
mALB ELISA Kit 大鼠微量蛋白Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-TRA16 激素受体相关蛋白16抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Gliomedin/COLM 神经胶质蛋白(肝癌相关基因2)抗体 规格 0.2ml

Kim-1(Mouse Kidney injury molecule 1) ELISA KIT 小鼠肾损伤分子1 96T

NSBP1 英文名称： 核小体结合蛋白1抗体 0.1ml

ASMTL 英文名称： ASMTL蛋白抗体 0.2ml

Anti-TRA16 激素受体相关蛋白16抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
Rabbit Anti-rat IgG/RBITC 罗丹明标记的兔抗大鼠IgG 0.3ml

GIMAP6 英文名称： GTP酶IMAP家族成员6抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh Apg12 自噬相关蛋白12抗体 规格 0.2ml

Anti-IL-16/FITC 荧光素标记白介素16抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human sIgA/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的兔抗人分泌型IgA 规格 0.1ml

Rabbit Anti-human sIgA/FITC 荧光素标记兔抗人分泌型IgA抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
phospho-ERK1/MAPK-1/2(pThr183 + pTyr185) 磷酸化原活化蛋白激酶1/2抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

ATP敏感性钾通道亚基kir6.2抗体 Anti-ATP-sensitive K+ channel subunit Kir6.2 0.1ml

人乳腺成纤维细胞组织处理缓冲液Rhesus antibody Rh phospho-EGFR (Tyr1110) 磷酸化表皮生长因子受体抗体 规格 0.1ml

DMEM高糖培养液 250ml 国产

ZNF852 英文名称： 锌指蛋白852抗体 0.2ml

DCP 英文名称： 异常凝血酶原/脱-γ-羧基凝血酶原抗体 0.2ml

ATP敏感性钾通道亚基kir6.2抗体 Anti-ATP-sensitive K+ channel subunit Kir6.2 0.1ml